Fixace a odběr vzorků - veterinární histopatologická a

Transkript

Fixace a odběr vzorků - veterinární histopatologická a
VETERINÁRNÍ HISTOPATOLOGICKÁ A CYTOLOGICKÁ DIAGNOSTIKA
MVDr. Petr Fictum, Ph.D. & MVDr. Miša Škorič, Ph.D.
Adresa pro zasílání vzorků:
BIOCYT v.o.s., Bieblova 164/22a, 613 00 Brno-Černá Pole
tel. +420 737 117 859, +420 606 812 621,
email: [email protected]
K histopatologickému vyšetření se odebírají excize tkání a orgánů, které nejsou
poškozeny autolýzou, mrazem nebo mechanicky. Vzorky změněných tkání by měly zahrnovat i okolní, makroskopicky nezměněnou tkáň. Excize musí být provedeny ostrým nástrojem (nůž, skalpel, žiletka) a při další manipulaci nesmějí být deformovány. Vzorky o velikosti 1,5 x 1,5 x 0,5 cm jsou vhodné pro běžné histopatologické vyšetření. Plošné tkáňové vzorky, které se ve fixační tekutině kroutí a sbalují (např. střevo) je vhodné před
vložením do fixační tekutiny napnout na tužší papír. Vkládají se do širokohrdlých uzavíratelných nádobek, obsahující desetinásobný objem fixační tekutiny. Ta musí mít ze
všech stran dostatečný přístup k tkáňovému bločku, proto jej někdy podkládáme gázou
nebo filtračním papírem. Větší tkáňové excize podléhají v hloubce autolýze a znehodnocují vyšetření.
Nejpoužívanější fixační tekutinou je 10% neutrální formalin. Připraví se tak, že se
komerčně dodávaný 40% roztok formaldehydu (tj. „100%“ formalin) ředí vodovodní vodou
v poměru 1 : 9 , tj. 10% formalin (= 4% formaldehyd).
Doba fixace je v tomto roztoku asi 24 - 48 hodin a excize lze v tomto roztoku
uchovávat několik měsíců.
V ideálním případě je vhodné zasílané biopsie doplnit o detailní anamnestické
informace a eventuálně o makroskopické fotografie lézí a RTG snímky, což je důležité
zvláště v případě kostních biopsií.
Základní informace při odběru kožních biopsií:
Výběr vhodného místa:
• pokud možno tři stádia chorobného procesu
• časnou, vyvíjející se typickou lézi
• alopetická léze – velká elipsoidní biopsie
• okraje ulcerace
• biopsie po vysazení steroidů
Technika (punkční, tenkojehelná, aj.):
bez holení, čištění, škrabání apod., pouze ostříhat srst
minimální traumatizace (ostré nástroje)
dostatečně do hloubky včetně podkoží (tuk), kolmo k povrchu a rovné okraje
podélná osa elipsovitých biopsií ve směru růstu chlupů
před fixací několik vteřin ponechat na podložce epidermis nahoře