stáhnout
Transkript
Lipáza - F Kolorimetrie Kat. číslo 166 200 Velikost balení 5 x 20 ml R1 Referenční hodnoty (37°C) 1 x 25 ml R2 ≤ 1,0 μkat/l Kolorimetrická metoda, kinetika. Poznámka: Uvedená data jsou pouze doporučením, každá laboratoř by si měla stanovit vlastní referenční rozmezí. Princip Postup stanovení Metoda Kinetické stanovení následující přeměnu: lipázy, která katalyzuje 1,2-o-dilauryl-rac-glycero-3-glutaro-(6- metylresorufin)ester lipáza,kolipáza ←—→ 1,2-o-dilauryl-rac-glycerol+ glutaro(6-metylresorufin)ester glutaro(6-metylresorufin)ester —→kyselina glutarová + metylresorufin Syntetický substrát DGMRE je lipázou štěpen na žlutě zbarvený produkt – metylresorufin. Nárůst absorbance je měřen fotometricky. Reakce je vysoce specifická pro humánní enzym. Složení reagencií Good´s pufr (pH 8,0) taurodeoxycholát deoxycholát CaCl2 kolipáza vínanový pufr (pH 4,0) taurodeoxycholát DGMRE emulgátory R1 R2 40 mmol/l 3,4 mmol/l 2,6 mmol/l 12 mmol/l 1mg/l 1,5 mmol/l 3,4 mmol/l 0,13 mmol/l Reagencie lze použít pro manuální stanovení (viz níže) nebo na většině analyzátorů. Aplikace na vyžádání. Vlnová délka: Teplota: Kyveta : Činidlo R1 Vzorek, kalibrátor 1 000 μl 20 μl Opatrně promíchejte a inkubujte 1 až 5 minut a poté pipetujte: Činidlo 2 250 μl Opatrně promíchejte a po dvouminutové inkubaci začněte sledovat změnu absorbance po dobu 2 minut. Vypočítejte změnu absorbance za minutu ΔA. Výpočet katalytické koncentrace ΔA/min vzorek Katalyt. koncen. lipázy (μkat/l) = —————— x c ΔA/min kalib. Upozornění 580 nm (578 nm) 37°C 1 cm Pouze pro použití in vitro. c = koncentrace kalibrátoru v μkat/l Stabilita reagencií Reagencie jsou stabilní do uvedeného data exspirace, pokud jsou skladovány při teplotě 2-8°C a chráněny před světlem. Přepočítávací faktor U/l x 0,0167 = μkat/l Kalibrace a kontrola Příprava pracovního činidla Činidla R1 a R2 jsou připravena k použití. Vzorek Pro kalibraci je doporučen multikalibrátor Greiner (kat.číslo 280 000). Ke kontrole použijte kontrolní séra Unitrol I a Unitrol II. Nehemolytické sérum, plasma (heparin) Stabilita: 24 hodiny při 15-25°C 5 dnů při 2-8°C 1 rok při -20°C 5/2006 1 Greiner Diagnostic GmbH – Unter Gereuth 10 – D 79353 Bahlingen – Germany www.greiner-diagnostic.com Charakteristika stanovení (37°C) ■ Linearita Likvidace odpadu Podle místních legislativních nařízení. Stanovení je lineární do hodnoty katalytické koncentrace lipázy 5 μkat/l. Pokud je tato hodnota překročena, opakujte stanovení se vzorkem ředěným 2x (1 + 1)fyziologickým roztokem (NaCl 9g/ l). Výsledek vynásobte 2. ■ Mez detekce Literatura 1. 2. 0,05 μkat/l ■ Přesnost Přesnost v sérii n=40 průměr (U/l) vzorek 1 13,4 vzorek 2 58,9 vzorek 3 103 Celková přesnost n=40 průměr (U/l) vzorek 1 13,4 vzorek 2 58,9 vzorek 3 103 SD (U/l) CV( %) 3. 0,24 0,60 1,50 1,81 1,01 1,45 4. SD (U/l) CV( %) 0,24 0,49 0,65 1,81 0,82 0,83 5. 6. ■ Korelace Srovnání reagencií Greiner bylo provedeno s komerčně dostupnými reagenciemi na 67 pacientských vzorcích s těmito výsledky: korelační koeficient r = 0,999 lineární regrese y = 0,96 x – 1,15 U/l 7. Lorentz K, Lipase in: Thomas L, editor – Clinical laboratory Diagnostics 1st ed, Frankfurt, TH-Books Verlagsgesselschaft; 1998, p.95-7 Moss DW, Henderson AR. Digestive enzymes of pancreatic origin. In:Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3 rd ed. PhiladelphiaW.B Saunders Company; 1999, p.689-708 Tietz N, Shuey DF. Lipase in serum – the elusive enzyme – an overview, Clin Chem 1993, 39, 746-56 Lott J, Patel ST, Sawhney AK, Kazmierczak SC, Love JE. Assays of serum lipase: analytical and clinical considerations. Clin Chem 1986. 32, 12901302 Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of serum lipase activity. Adv Clin Enzymol 1986, 4, 60-7 Bongström B. The action of bile salts and other detergents on pancreatic lipaseand the interaction with colipase. Biochemica and Biophysica Acta 1977,488, 381-91 Gargouri Y, Julien R, Bois A, Verger R, Sarda L. Studies on the detergent inhibition of pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983, 24, 1336-42 Interference Kyselina askorbová – neinterferuje do koncentrace 1700 μmol/l. Triacylglyceroly – neinterferují do koncentrace 11,5 mmol/l. Bilirubin – neinterferuje do koncentrace 1020 μmol/l. Hemoglobin - neinterferuje do koncentrace 500 mg/dl. 5/2006 2 Greiner Diagnostic GmbH – Unter Gereuth 10 – D 79353 Bahlingen – Germany www.greiner-diagnostic.com
Podobné dokumenty
AMYLASE
Kalibrace a kontrola Pro kalibraci je doporučen multikalibrátor Greiner (kat.číslo 280 000). Ke kontrole použijte kontrolní séra Unitrol I a Unitrol II.
VíceKolorimetrický test s Dibrom
8 °C může se objevit precipitace. V takovém případě je nutno reagencii po dobu dvou hodin vytemperovat při teplotě kolem 20°C a poté sraženinu roztřepat.
VíceEdiční poznámka a bibliografie
Dodds, E. R., Morals and Politics in the Oresteia, in: The Ancient Concept of Progress and other essays on Greek Literature and Belief, Oxford, 1973. Dumortier, J., Les images dans la poésie d’Esc...
VíceCenik vyprodej VT
vůči teplotním výkyvům. Ve srovnání s PEX trubkami je výhodou minimální tepelná roztažnost, 100% kyslíková bariera, přičemž nabízí vysokou ohebnost a vynikající tvarovou stálost. Proto je ideální p...
VíceTeoretický úvod a návod - Ústav lékařské biochemie
projevují změnami v zastoupení jednotlivých frakcí bílkovin krevního séra či patologickou přítomností bílkovin (sérum, moč, likvor). Elektroforéza séra probíhá v pufru o alkalickém pH. Frakce, kter...
VíceObnova bloku č. 5, 400 MWe, Planta Centro, Carabobo, VENEZUELA
Jmenovitý tlak přehřáté/přihřáté páry
Víceunitrol 1000
který usnadňuje uvedení do provozu a umožňuje provozní optimalizaci. Přístroj splňuje požadavky všech příslušných mezinárodních norem. Mechanická konstrukce je extrémně kompaktní a robustní. Tento ...
Víceproduktový katalog - pdf.
kinetické měření, nárůst absorbance 405 nm (400-420 nm) Sérum, heparinizovaná plazma do 4,73 µkat/l (Szasz, start substrátem) do 3,87 µkat/l (Szasz , start vzorkem) do 5,35 µkat/l (IFCC, start subs...
VíceDietní vláknina a esenciální složky potravy
V ovoci nalézáme především pektiny. Základní struktura je tvořena lineárním řetězcem Dgalakturonové kyseliny a jednotky galakturonové kyseliny jsou do různého stupně (průměrně 70 %) esterifikovány ...
VíceZnečištění ovzduší oxidem dusným a vliv
Vliv N2O na skleníkový efekt a na stratosférický ozón Přestože H2O a CO2, obsažené v atmosféře, způsobují kolem 90 % skleníkového efektu, je vliv N2O významný nejen pro dlouhou dobu setrvání v atmo...
Více