Chromozomální aberace nalezené u párů s poruchou reprodukce v

Chromozomální aberace nalezené u párů s
poruchou reprodukce v letech 2000-2005
Jak přistupovat k nálezům minoritních
gonozomálních mozaik?
Šantavá A., Adamová, K.,Čapková P., Hyjánek J.
Ústav lékařské genetiky a fetální medicíny
FN Olomouc
Infertilita
- definována jako neúspěšná snaha o koncepci do 1 roku
- postihuje 1 ze 6 párů ve fertilním věku (16,6%)
Příčiny infertility:







Genetické
Hormonální
Imunologické
Mechanické
Důsledek infekčního onemocnění
Důsledek obezity (podvýživy)
Psychologické
U 20 % případů nejsou příčiny infertility objasněny
Genetické příčiny infertility




Chromozomální aberace
Syndromy
Genové mutace
Polymalformace
U párů s poruchou reprodukce se vyskytují
chromozomální aberace u 5 – 13 %
Aberace chromozomů u infertilních párů

reciproké autozomální translokace

reciproké translokace gonozomy a autosomy

Robertsonské translokace

ring-chromozom, event. marker

u mužů strukturální aberace Y chrom:
delece
inverze
ring
Chromozomální aberace jako příčina
mužské infertility
Aberace pohlavních a somatických chromozomů se
vyskytují u 5 - 14% se mužů s oligo a azoospermií
Nejčastější chromozomální aberace:

Klinefelterův sy: karyotyp 47,XXY
nebo mozaika 47,XXY/46,XY
(výskyt u 10 % mužů s azoospermií)
Aberace pohlavních chromozomů jako
příčina ženské infertility


Turnerův sy
- karyotyp 45, X
- strukturální aberace X chromozomu
(delece Xp nebo Xq)
- mozaikové formy (46,XX/45,X) aj.
Syndrom “triple X” - karyotyp XXX
Chromozomální vyšetření u párů
podstupujících IVF v letech 2000-2005
Vyšetřeno celkem: 1846 pacientů
---------------------------------------------------------------------Nalezeno:
113 chromozomálních aberací (6,1%)
Ž
38 konstitucionálních chrom. abnormalit: 17
75 mozaik gonozomů:
70
M
21
5
Výsledky chromozomálního vyšetření
u párů podstupujících IVF v letech
2000-2005
Nalezené konstitucionální CHA
Nálezy minoritních mozaik
mozaiky gonozomů
Ž
M
75 ze 113 CHA (66,37%)
70
5
U 22 mozaik byla provedena kontrolní FISH analýza:
shodný nález ………………………………………….6
cytogeneticky detekovaná frekventnější mozaika….…3
FISH detekovaná frekventnější mozaika……….…....13
U většiny vzorků nalezena diskrepance mezi
cytogenetickými a FISH výsledky !
Případy detekce frekventnějších mozaik
konvenční cytogenetickou technikou
Případy detekce frekventnějších mozaik
FISH technikou
pacienti
cytogenetický nález
poměr
poměr
nález FISH
X
XXX
XX
1.
45,X[2]/46,XX[40]
1:20
32
0
74
1:2
2.
47,XXX[2]/46,XX[50]
1:25
40
4
20
2:1
3.
45,X[3]/46,XX[46]
1:15
3
11
118
1:8
4.
45,X[2]/46,XX[50]
1:25
8
7
117
1:8
5.
47,XXX[2]/46,XX[46]
1:13
35
4
62
1:2
6.
45,X[2]/46,XX[30]
1:15
6
4
97
1:10
7.
47,XXX[1]/45,X[1]/46,XX[30]
1:15
25
2
67
1:2
8.
45,XXX[2]/46,XX[40]
1:20
40
5
180
1:4
9.
47,XXX[2]/46,XX[63]
1:30
15
3
125
1:7
10.
47,XXXX[1]/46,XX[42]
1:40
25
0
65
1:2,5
11.
45,X[3]/46,XX[25]
1:8
23
1
82
1:3
12.
47,XXX[3]/45,X[21]/46,XX[15]
1,6:1
50
2
16
3:2
13.
47,XXX[2]/46,XX[26]
1:13
21
6
69
1:2,5
Komplikace při interpretaci
gonozomálních mozaik
Detekované frekvence jednotlivých klonů se mohou lišit:

V různých typech vyšetřované tkáně
(periferní lymfocyty, kožní fibroblasty, germinální buňky aj.)
=> jiný nález u prenatálního vs. postnatálního vzorku
od téhož pacienta

Podle použité detekční metody (cytogenetická vs. FISH)
Kazuistika I.
K.H. (*1969) - I. gravidita, triple test nebyl odebrán
- krvácení v 16. t. gravidity
______________________________________________________
Grav. hd. 17: hospitalizace pro krvácení
Nález UZ: rozsáhlý vnitřní hydrocefalus u plodu

Kultivované fibroblasty: 47,XY,+21

Placenta: 47,XY,+21

Karyotyp matky z
perif. krve (FISH): 47,XXX(5)/45,X(10)/46,XX(107)
1:7
Kazuistika II.
Indikováno vyšetření karyotypu plodu v 17. týdnu
grav. z důvodu pozitivního skríningu II. trimestru

Karyotyp plodu z PV:
47,XXY[9]/46,XY[56]
1 : 6


Karyotyp dítěte z perif.
lymf. (v 1/2 roce věku):
47,XXY[1 ]/46,XY[33]
FISH (tentýž preparát):
XXXY
1
1 : 33
XXY
54
1 : 2
XY
121
Kazuistika III.
Indikováno vyšetření karyotypu plodu v 19+6
týdnu gravidity z důvodu pozitivního triple testu
45,X

Karyotyp plodu z PV:

Kontrolní UZ vyšetření: detekováno pohlaví mužské
(g.h. 22+5)
fyziologický nález na genitálu

QF PCR (DNA z PV):
detekovány Y specif. sekvence
(SRY, DYZ 3, TSPY, AMELX, AMELY)
kvantit. susp. mozaika 1: 5 -10

FISH (kult. amniocyty):
X
98
XY
24
Frekvence CHA u párů s poruchou
reprodukce:

Literární data: 5 – 13 %
Naše studie: 6,1 %
Frekvence CHA v běžné populaci ∼ 0,6 % (Emery, 1990)

Frekvence balancovaných translokací u infertilních žen:
Literární data: 1,14 %

Naše studie: 1,08 %
Frekvence gonozomálních mozaik u infertilních žen:
Literární data: 1,14 %
Naše studie: 7,58 %
Souhrn doporučených genetických vyšetření
před IVF programem

genetická konzultace

chromozomální vyšetření - zaměřené i na detekci
gonozomálních mozaik

DNA analýza mutací CFTR genů

DNA analýza mikrodelecí AZF

genetické vyšetření dárců
Děkuji vám za pozornost
?