Martina Kadlecová
Transkript
MOLEKULÁRNÍ BIOTECHNOLOGIE aneb jak dnes vyrábíme inzulin T-exkurze, podzim 2012 vypracovala: Martina Kadlecová lektor: Lukáš Chrást Proč jsem si zvolila toto téma? ...připadalo mi takové zvláštně provokativní ● ● ● GMO organismy! Nesežere mě to?! Biotechnologie. Tak se dělá těsto, pivo a sýr. Ale inzulin? Molekulární... hm.. to zní jako výzva.. TEORETICKÁ ČÁST GMO organismy nemusí být nutně škodlivé ● přijmutí okolní cizorodé DNA bakterií se vyskytuje docela běžně 1928 Griffitův experiment ● ● všechno je pod přísným dohledem vynesení GMO materiálu z laboratoře se trestá vysokými pokutami … není potřeba se bát Jak udělat bakterii, co produkuje inzulin? 1. do plazmidu vložíme úsek DNA, který kóduje výrobu cílového produktu 2. vypěstujeme si vhodnou bakterii – třeba E. coli 3. přinutíme bakterii, aby plazmid přijala 4. bakterie obohacené o novou DNA pěstujeme ve fermentoru 5. sklidíme výsledný produkt PRAKTICKÁ ČÁST 18. prosince 2012 Loschmidt laboratories, Masarykova univerzita 8:45 – 15:00 ● ● ● plášť a přezůvky s sebou nastudovat si bezpečnostní pokyny pro práci v laboratoři oběd zajištěn v Academic canteen ÚLOHA 1: chemická transformace buněk Jak dostat plazmid s cílovým genem do bakterie? ● ● ● Nejdříve musíme umět pipetovat malé objemy. Plazmid se přidá k bakteriím, celé se to zahřeje, zchladí, protřepe. Pak naneseme na misku s agagrem a necháme přes noc kultivovat. ...na fotce vidíte, co mi vyrostlo! ÚLOHA 2: křížový roztěr bakteriální kultury Máte směs několika neznámých druhů bakterií. Chcete vědět, co jsou zač. Co uděláte? ● Na Petriho misku s agarem naneseme do jednoho místa směs bakterií. ● Kličkou z tohoto místa vedeme čáry. ● Vyměníme kličku a děláme další čáry. ● A nakonec had. … celým postupem se směs bakterií naředí a až narostou, budeme schopni jednotlivé kolonie určit … když to dělá profesionál, může to vypadat jako na tomto obrázku … když jsem to dělala já, dopadlo to takhle ● směs bakterií Micrococcus luteus (žluté) a Kocuria rosea (růžové) ÚLOHA 3: exprese rekombinantního proteinu v laboratorním fermentoru … jak se ty rekombinantní potvůrky vlastně pěstují ● ● musí se s nimi míchat, zajistit jim optimální teplotu a pH potřebují také něco žrát … a my jsme si je chvíli zkusili pěstovat ve fermentoru podobném tomu na obrázku Jak je to vlastně s inzulínem? ● ● ● pro pacienty s cukrovkou ho potřebujeme hodně není technicky možné získávat ho ze slinivek prasat a krav... museli bychom mít těch slinivek strašně moc proto je jednodušší chovat místo krav rekombinantní bakterii E. coli, která izulín vyprodukuje rychle, levně a šetrně k životnímu prostředí … to jsem teď chytrá, že! :) ZÁVĚR … celá exkurze byla zábavná ● dozvěděla jsem se spoustu nových věcí ● vše jsem pak viděla v praxi ● dostala jsem se do moderních laboratoří … víte, že pracují i s halogenalkan dehalogenasou?? ● zjistila jsem, jak že je to s tím inzulínem … jsem moc spokojená, díky moc!!!
Podobné dokumenty
Lucie Ulrichová
Nastupuji na vlak do Brna a cestou ještě rychle pročítám materiály, které by se dnes mohly hodit. Za chvíli už přesedám na autobus směrem ke Kampusu Bohunice a ve vestibulu čekám, co se bude dít. J...
VíceLAB DIAG 161013.xlsx
Kluyvera intermedia Kocuria kristinae Kocuria rhizophila Kocuria rosea Kocuria varians Kytococcus schroeteri Lactobacillus acidophilus Lactobacillus aviarius Lactobacillus casei Lactobacillus delbr...
VícePřednášky na bílém
● nízký poměr P/CHSK v surové OV preferuje GAO vysoký poměr P/CHSK v surové OV preferuje PAO ● (teploty nad 30°C preferují GAO) ● pH 7,2 – 8,0 se jeví jako optimální pro preferenci PAO Competibacte...
Více1. Stěry a otisky
Z hlediska různorodosti bylo nejvíce patogenních kmenů zjištěno na pracovištích ve Strážnici. Nicméně ani zde se nejedná o stav, který by vyžadoval zásah z hlediska nebezpečí pro zdraví nebo poškoz...
VíceMICRONAUT RPO stručný návod
MICRONAUT - RPO identifikace nejvýznamnějších gram pozitivních bakterií pomocí 44 biochemických reakcí MICRONAUT-RPO se skládá z 44 klasických biochemických testů upravených pro mikrotitrační formát.
Více1. Historický úvod
dosaženo tlaku až 1.10-3 Torr. Tlaky menší než 1 Torr přinesly velké problémy s jejich měřením, neboť výška sloupce rtuti pro tyto tlaky je velice malá. Roku 1874 zkonstruoval Herbert McLeod tzv. k...
VíceNematoda (Hlístice)
http://www.nematodes.org/ http://nemys.ugent.be/start.asp?group=2 http://www.stranypotapecske.cz/biologie/default.asp http://www.kbi.zcu.cz/studium/invert/obra.php
VíceHuman Body by D Velcek CZ
Dr. Bruce Lipton ale prokázal, že to není pravda. Je nám tvrzeno, že používáme jen asi 10% našich genů, zatímco zbytek genů j...
Více