Význam antifosfolipidových protilátek v reprodukci

Význam antifosfolipidových
protilátek v reprodukci
Zdenka Ulčová - Gallová
www.fnplzen.cz/ulcovagallova
Gynekologicko-porodnická klinika LF UK a FN, Plzeň
Fosfolipidy
•
•
•
•
•
•
•
•
Kardiolipin
Ph-serine
Ph-inositol
Ph-cholin
Ph-sfyngomyelin
Ph-ethanolamin
Ph-glycerol
Beta2-GPI
• Annexin (V)
• Laminine
Krátké ohlédnutí od doby Wassermanna
1942 Mary Pangborn –ident. “cardiolipin“ jako
anionický fosfolipid
1950 More et al. SLE
LA (lupus jako anticoag.):
1955-1957 Laurell et al., Lee et al.
1963-65 Bowie et al., Alacron-Segovia et al.
aCL-ELISA: Harris et al., Loizou et al., Soulier and
Boffa, …(1980.....)
Definice APA-syndromu I-II
1983, 1999, 2006 (Sapporo – Sydney criteria)
Hughes
Branch
Koike
Rote
Kim-Kwak
McIntyre
Triplett
Balash
Youinou
Gleicher
El-Roeiy
Shoenfeld
Julkunen
Nip
Cervera
Lockshin
Bridsall
et al.
Harris
Khamasta
APA-syndrom I a II
↑ APA
• Trombocytopenie
• Trombosis
• Selhávání v reprodukci
European forum on
antiphospholipid antibodies
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Hematologové
Revmatologové
Gynekologové a porodníci
Infekcionisté
Kardiologové
Neurologové
Internisté
Pediatři
Laboratorní pracovníci
Antifosfolipidové protilátky
• K 15.6. 2010
8875 článků v pubmed
Antifosfolipidové protilátky
Interference s membránovými fosfolipidy
1. Prekoncepčně: oocyt (ovarium),
spermie
2. Postkoncepčně: časné embryo
APA - autoprotilátky spojené se selháváním v reprodukci
zahrnují tyto mechanismy:
APA přímo se vážící na fosfolipidy (např. kardiolipin,
ph-serin, ph-ethanolamin)
APA váží fosfolipid via fosfolipid-vážící
glykocoproteiny jako je ß2-glycoprotein-I, annexin V a
protrombin
APA přímo namířené proti lamininu-I, tromboplastinu,
prolactinu, tyroglobulinu -
Imunologické nálezy APA
protilátek u těchto dg.
•
•
•
•
•
•
Neplodnost I a II
Potrácivost
Opakované IVF selhávání
Autoimunitní onemocnění
Onkologické onemocnění
Endometriósa, preeklampsie, PCO,
HELLP, LUF, POF
• U andrologického faktoru
M. Sanmarco, G. Reber, A. Béziane, U. Gaipl,
B. Gilburd, G. Massai, M. Meissner, Z. Ulcova–Gallova,
D. Ponard, and MC. Boffa
150 questionnaires
11 replies
7 laboratories perform
aPEaPE
-ELISA
U. Gaipl - Institute of Clinical Immunology-Erlangen-Germany
G. Massai - Laboratory of Immunology-Florence-Italy
M. Meissner & B. Wojciechocska - Institute of RheumatologyWarsaw-Poland
D. Ponard - Laboratory of Immunology-Grenoble-France
M. Sanmarco - Laboratory of Immunology-Marseille-France
Y. Shoenfeld & B. Gilburd - Center for Autoimmune Diseases-TelHashomer-Israel
Z. Ulcova – Gallova - Dept Gynecology and obstetrics- Pilsen-Czech
Prevalence and clinical correlations of antibodies against six beta2glycoprotein-I-related peptides in the antiphospholipid syndrome.
Shoenfeld Y, Krause I, Kvapil F, Sulkes J,
Lev S, von Landenberg P, Font J, Zaech
J, Cervera R, Piette JC, Boffa MC,
Khamashta MA, Bertolaccini ML, Hughes
GR, Youinou P, Meroni PL, Pengo V,
Alves JD, Tincani A, Szegedi G, Lakos G,
Sturfelt G, Jönsen A, Koike T, Sanmarco
M, Ruffatti A, Ulcova-Gallova Z, Praprotnik
S, Rozman B, Lorber M, Vriezman VB,
Blank M.
Features associated with epilepsy
in the antiphospholipid syndrome
• Shoenfeld Y, Lev S, Blatt I, Blank M, Font
J, von Landenberg P, Lev N, Zaech J,
Cervera R, Piette JC, Khamashta MA,
Bertolaccini ML, Hughes GR, Youinou P,
Meroni PL, Pengo V, Alves JD, Tincani A,
Szegedi G, Lakos G, Sturfelt G, Jönsen A,
Koike T, Sanmarco M, Ruffatti A, UlcovaGallova Z, Praprotnik S, Rozman B,
Lorber M, Chapman J, van-BredaVriezman PJ, Damoiseaux J.
Zkušenosti
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Opakované potraty (do 12.týdne, nad 12.týden)
Opakovaná selhávání v IVF
Opakované zamlklé potraty
Opakované mrtvě rozené plody
Předčasné porody
IUGR
Diabetes mellitus
Preeclampsia
Endometrióza
APA (IgG, IgA, IgM)
•
•
•
•
•
•
ph-L-serin
ph-L-glycerol
ph-L-inositol
ph-ethanolamin
ph-acid
kardiolipin
β 2-GP
annexin V
lamimin I
APA – sy
Pre-e
Antigens-aPL
A
B
A
B
Phosphatidic acid
IgG
1/32
1/32
NT
2/59
IgM
0/32
0/32
NT
0/59
Ethanolamine
IgG
3/32
2/32
NT
1/59
IgM
0/32
0/32
NT
0/59
DL-Glycerol
IgG
IgM
1/32
0/32
1/32
0/32
NT
NT
1/59
0/59
APA – sy
Inositol
IgG
IgM
L-Serine
IgG
IgM
Cardiolipin
IgG
IgM
β2-glycoprotein
IgG
IgA
Pre-e
5/32
1/32
4/32
0/32
NT
NT
3/59
0/59
3/32
1/32
3/32
0/32
NT
NT
1/59
0/59
5/32
2/32
4/32
1/32
NT
NT
3/59
4/59
3/32
14/32
2/32
13/32
NT
NT
2/59
16/59
diabetes mellitus
autoimmune disease
Antigens –aPL
Phosphatidic acid
IgG
IgM
Ethanolamine
IgG
IgM
DL-Glycerol
IgG
IgM
A
B
A
B
0/26
0/26
0/26
0/26
2/12
0/12
1/12
0/12
0/26
0/26
0/26
0/26
1/12
0/12
1/12
0/12
4/26
1/26
4/26
0/26
3/12
0/12
3/12
0/12
diabetes mellitus
autoimmune disease
Antigens –aPL
Inositol
IgG
IgM
L-Serine
IgG
IgM
Cardiolipin
IgG
IgM
β2-Glycoprotein
IgG
IgA
A
B
A
B
4/26
0/26
4/26
0/26
6/12
2/12
5/12
1/12
4/26
0/26
5/26
0/26
5/12
0/12
6/12
1/12
1/26
1/26
0/26
1/26
8/12
2/12
7/12
1/12
3/26
0/26
3/26
0/26
9/12
2/12
9/12
2/12
Ulcova-Gallova Z. et al.
Int.J.Fertil. and Wom. Dis, 2000
Patients – 2965 (women)
(1999-2004)
• Aged 22 - 44 years, Ø 27,5 years
• After
1 IVF: 1073
2 IVF: 853
and more
627- pregnancy loss 3 or more time
421- never pregnant,after dg.laparoscopy
31- fertile control group
Analýza 2965 žen s poruchou reprodukce
(AJRI, 54, 2005, p.112-117)
Protilátky proti
ph acid
IgG
IgM
ph ethanol G
M
DLglycer. G
M
phinosit
G
M
L-serin
G
M
kardiol
G
M
Beta2GP
A
G
P < 0,001
2965 pacientky
1926 IVF
627 potraty sp.
1.IVF 1073
2.IVF 853
%
%
%
129
21
172
21
182
64
204
107
343
150
204
21
107
21
12,02
1,96
16,03
1,96
16,96
5,96
19,01
9,97
31,97
13,98
19,01
1,96
9,97
1,96
111
9
205
26
136
34
409
94
435
137
145
51
102
34
13,01
1,06
24,03
3,05
15,94
3,99
47,95
11,02
51,00
16,06
17,00
5,98
11,96
3,99
113
31
63
4
113
25
314
31
292
5
100
66
100
3
18,02
4,94
10,05
0,64
18,02
3,99
50,08
4,94
46,57
0,80
15,95
10,53
15,95
0,48
dgL 412
%
52
16
39
23
31
5
52
5
61
12
46
30
23
1
12,62
3,88
9,47
5,58
7,52
1,21
12,62
1,21
14,81
2,91
11,17
7,28
5,58
0,24
2965 infertile women
APA analysis
60,00
50,00
%
40,00
1.IVF
2.IVF
misc.
dg.L
30,00
20,00
10,00
0,00
IgG IgM
G
M
G
M
G
M
ph acid
ph
DLglycer. phinosit
ethanol
G
M
L-serin
P <0.001
G
M
A
G
kardiol Beta2GP
Annexin V
Annexin V
• M.w. 36 kd fosfolipid-vážící glykoprotein
• Ochraný intravaskulární faktor
• Antikoagulant („soutěž“ o anionické fosfolipidy např. ph-serine, or
ß2-GPI) nebo Ab proti V-trombogennímu účinku annexin V
• Na povrchu trofoblastu, dále placentár.klků
• Ab-annexin V-významně redukují funkci plac. klků u APA sy
• Annexin V formuje protektivní pole exponované fosfolipidy
Annexin A5
Ejakuláty-výsledky
• Antiannexin Ab - žádné
• Annexin V Ag
Charakter ejakulátu
Ø
koncentrace
Annexin V
(ng/ml)
Standard
deviation
(c;ng/ml )
Minimum
(c;ng/ml)
Maximum
(c;ng/ml)
normozoospermia
30,81
22,11
0
95,19
oligoasthenospermia
37,3
62,9
0
584,65
azoospermia
38,17
20,3
1,48
69,95
• Během spermatogeneze stálá apoptóza
• Povrchové Annexin V antigeny jsou
uvolňované do semin.plazmy
• Vyšší c annexinu V u oligosthenosperm.
Potracená tkáň
• 168 pacientek
(26-41 let, Ø 29 let, spont. potrat nebo
missed abortion – 3x-7x)
hormonál., genetic., psychogen.
n. JEN AUTOIMMUN. FAKTORY?
84 zdravé, fert. ženy - kontrol. skup.)
Výsledky v séru
proti prothrombinu
anti-annexin V
Pacientky: 18/168 (12%)
26/168
(15,4%)
Kontroly:
0/84
0/84
Normální placent. histologie
Intervillos.prostory
Choriové klky s cévami
Hematoxylin and eosin, x 200
Cévy bez
trombu
Céva s
trombem
Chorionic villi
Červeně: apoptotic.buňky
Zeleně: mrtvé buňky
AIDS a HIV
Výsledky
aPls
HIV pozitivní
β2-GPI
ACA-IgG
ph-acid-IgG
ph-ethanol-IgG
ph-inosit.-IgG
L-serine-IgG
ph-glycerol-IgG
1/30
14/30
5/30
10/30
9/30
14/30
3/30
Pacient č. 9 - ♂, 41 let
:
IgG
ACA
acid
ethanol
L-serine
Odběr krve:
Roky:
0
70,374
0,409
0,195
0,407
2
2,547
0,053
0,017
0,122
5
1,606
0,028
0
0,066
Patient č. 11 - ♂, 35 let
IgG
Odběr krve
Roky:
ACA
acid
ethanolam
inosit
L-serine
0
34,612
0,317
0,184
0,127
0,356
2
29,675
0,389
0,238
0,15
0,418
5
27,156
0,181
0,274
0,064
0,303
Pacientka č. 20 - žena, 33 let
IgG
Odběr krve
ACA
acid
ethanol
D-glyc
inosit
L-seri
0
81,129
0,748
0,649
0,433
0,207
1,022
2
2,223
0
0
0
0
0,032
5
1,727
0,042
0
0
0
0,024
Závěry
APA ↑ u: 10/11 homosexualních ♂
7 /10 heterosexualních
Homosexual. „pohlavní styk“ u stejných dvojic-pacientů
-velmi podobný APA profil
- U plně rozvinutého AIDS (u našich 30 nemocných
bez rozdílu věku – přítomnost vysokých
hladin APA
Endometriosis a reprodukční
selhání
• Ulcova-Gallova et al. Am J Reprod
Immunol. 2002 May;47(5):269-74.
Ig
G
APA against
A
nt
iz
on
al
Ig
A
an
tib
S
pe
od
rm
ie
s
an
tib
od
ie
s
Ig
M
Ig
ph
M
-a
ci
d
Ig
G
ph
-e
th
an
Ig
M
ol
am
in
Ig
G
ph
Ig
-in
M
os
ito
lI
gG
ph
-g
Ig
ly
M
ce
ro
lI
gG
Lph
Ig
-s
M
er
in
e
Ig
G
C
ar
di
ol
ip
in
%
Am J Reprod Immunol. 2000 Oct;44(4):236-41.
Endometriosis I-II
Endometriosis I-II
45
40
35
30
25
PF %
S%
20
15
10
5
0
ar
di
ol
ip
in
Ig
G
APA against
An
tiz
on
al
an IgA
Sp
tib
er
od
m
ie
an
s
tib
od
ie
s
Ig
M
Ig
ph
M
-a
ci
d
Ig
G
ph
-in
I
os gM
ito
lI
ph
gG
-e
th
an
Ig
ol
am M
in
Ig
G
Lph
Ig
-s
M
er
in
e
Ig
G
ph
-g
Ig
ly
M
ce
ro
lI
gG
C
%
Endometriosis III-IV
Endometriosis III-IV
40
35
30
25
20
PF %
S%
15
10
5
0
APA against
in
Ig
M
Ig
G
Ig
M
Ig
G
Ig
A
an
tib
od
Sp
ie
er
s
m
an
t ib
od
ie
s
on
al
ph
-a
c id
am
gG
Ig
M
to
lI
Ig
M
gG
Ig
M
er
ol
I
ph
-in
os
i
ph
-g
lyc
ph
-e
th
an
ol
An
tiz
Ig
G
Ig
LM
ph
-s
er
in
e
Ig
G
Ca
rd
io
lip
in
%
Normalní laparoskop. nálezy
Normal Findings
35
30
25
20
PF %
15
S%
10
5
0
Preeclampsia
• Urgentní ukončení gravidity
• ↑ Ab x ph serine IgG
• ↑ Ab x ACA, IgG, IgM
• ↑ Ab x beta 2 GPI IgA
Antifosfolipidové protilátky jsou intimně
spojovány s autoimunitním onemocněním,
a reprodukčním selháváním
• Hladiny APA jsou různé, u různých
pacientů
• APA prokazují širokou polyklonální Blymfocytární aktivaci
• APA jsou ukazatelem správné léčby
anti-Cardiolipin (IgG, IgM), ß2-GPI (IgG, IgM), LA
anti-Cardiolipin / ß2-GPI
and/or LA borderline
anti-Cardiolipin / ß2-GPI
and/or LA negative
Prothrombin
Annexin V
Laminin
anti-Cardiolipin / ß2-GPI
and/or LA positive
Repeated testing
after 12 weeks
Positive
Repeated testing
after 12 weeks
Increased risk of
reproductive failure
Repeated testing
after 12 weeks
Naše významnější publikace
1.
2.
3.
Christiansen O., Ulcova-Gallova Z., Krauz V., et al:
Studies on associations between HLA clas II alleles
and aPLs in Danish and Czech women with
RPL.Human Reprod. 1998, 13, p.3326-3231.
Ulcova-Gallova Z., Bouse V., Krizanovska K., Balvin
V., Rokyta Z.: Beta2- Glycoprotein I is a good Indicator
of Certain Adverse Pregnancy Conditions. Int.J.Fertil.
and Women Dis.,2001, 46, p.304-308
Ulcova-Gallova Z., Bouse V., Svabek L.,Turek
J.,Rokyta Z.: Endometriosis in Reproductive
Immunology. Am.J.Reprod.Immunol. 2002, 47, p.269274
Další publikace
4. Sedlacek D., Ulcova-Gallova Z. et al: Seven
Antiphospholipid Antibodies in HIV positive Patients:
Correlation with Clinical Course nad Laboratory
Findings: AJRI 30, 2003, 439-443
5. Ulcova –Gallova Z. et al: Anti-phospholipid Antibodies
against Phosphatidylinositol, and Phosphatidylserine are
More Significant in Reproductive Failure than Antibodies
against Cardiolipin only.AJRI 54, 2005,112-117
6. Ulcova-Gallova Z.: Antiphospholipid Antibodies and
Reproductive Failure.Chem.Immunol.Allergy 88, 2005,
139-1494
7. Ulcova-Gallova Z. et al.:Antibodies against Annexin V
and Prothrombin, their Correlation with other Antiphospholipid Antibodies in Recurrent Pregnancy Loss.
J.Reprod.&Contraception 16, 2005, 35-46
8. Subrt I, Ulcova-Gallova Z. et al.:Recurrent pregnancy
loss and frequency of eight antiphospholipid antibodies
and genetic thrombophylic factors in Czech women Am
J Reprod Immunol. 2008 Mar;59(3):193-206
9. Hradecký Z, Šubrt I., Ulcová-Gallová Z.:Urgent
termination of pregnancy in pre-eclampsia and panel of
antiphospholipid antibodies.
Am.J.Reprod.Immunol.2009,Dec;62(6):412-7.
APA
Markery patologického procesu
Klinicky heterogenní
Zprozstředkující faktor idiotyp-antiidiotypové sítě
www.apaplzen2011.cz
Medicína
a antifosfolipidové protilátky
23.- 25.6.2011 v Plzni