CerTest-VIDITEST Strep A Blister Jednokrokový blisterový

CerTest-VIDITEST
Strep A Blister
Jednokrokový blisterový test pro detekci antigenu Streptokoka A ve výtěru z krku
Návod k použití soupravy
Výrobce: CerTest, E-500 18 Zaragoza, Spain
Distributor: VIDIA spol.s r.o., Nad Safinou II č. 365, Vestec, 252 42 Jesenice, ČR, tel: +420 261 090 565
POUŽITÍ
„CerTest-VIDITEST Strep A Blister“ je jednokrokový chromatografický test pro kvalitativní
detekci antigenu Streptokoka A. Může být použit pro krční výtěry, nebo pro potvrzení
pravděpodobného nálezu kolonií Streptokoka A v kultuře.
ÚVOD
Streptokokové infekce typu A jsou způsobeny Streptokokem A, bakterií zodpovědnou za
širokou škálu zdravotních problémů. Tyto infekce se mohou projevovat od lehkého kožního
zánětu nebo bolesti v krku až po závažné život ohrožující stavy, jako je syndrom toxického
šoku a nekrotizující fascitis (postižení měkké tkáně). Většina lidí zná streptokokovou krční
infekci, která je vedle méně závažné kožní infekce nejčastější formou nákazy. Zdravotní
experti odhadují, že se každý rok objeví více než 10 milionů mírných infekcí krku a kůže
tohoto typu. Běžný způsob identifikace Streptokoka typu A z krčních výtěrů zahrnuje izolaci
a následnou identifikaci živých patogenů technikou trvající 24 až 48 hodin, někdy i více.
CerTest Strep A Test detekuje živé i neživé organismy přímo z krčního výtěru. Výsledky
poskytuje do 5 minut.
PRINCIP TESTU
CerTest-VIDITEST Strep A Blister je kvalitativní imunochromatografický test pro stanovení
antigenů Streptokoka typu A. Na testovací zóně membrány blisteru jsou navázány myší
monoklonální protilátky.
Během testování vzorek reaguje s imobilizovaným barevným konjugátem (anti –
Strep A protilátky – červená mikrosféra). Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po
membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými
protilátkami, což se ve „výsledkové zóně“ projeví jako červená linka. Směs pak vzlíná dále po
membráně k imobilizovaným protilátkám v „kontrolní zóně“, kde se vždy na konci testu
objeví modrá linka. Přítomnost modré linky ověřuje:
1) že se použil dostatečný objem vzorku,
2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku,
3) interní kontrolu reagencií.
-1-
OBSAH SOUPRAVY
-
Testovací blistery
Reagencie A (2M dusitan sodný) a Reagencie B (0,15M kyselina octová)
Testovací zkumavky
Sterilní odběrové tampony
Jednorázové pipety
Manuál
POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU
-
Jednorázové rukavice
Stopky
SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ
Vzorky odebírejte sterilním odběrovým tamponem z mandlí a zadní části hrtanu. Buďte
opatrní, aby stěrka nepřišla do styku se zuby, dásněmi, jazykem a vnitřní stěnou tváří.
Zpracujte co nejdříve po odebrání vzorku. Pokud vaše laboratoř vyžaduje kromě CerTest
Strep A Testu i výsledky bakteriální kultury, potřete odběrovým tamponem se vzorkem
kultivační misku ještě před začátkem testu. Působením extrakčních reagencií testu vzorek
odumírá.
Vzorky mohou být před testováním skladovány při laboratorní teplotě, nebo v chladničce (24°C) maximálně po dobu 24 hodin. Vzorky a testovací sada musí být před použitím
temperovány na laboratorní teplotu.
POTVRZENÍ KULTURY
CerTest Strep A Test může být použit také k potvrzení identifikace Streptokoku typu A na
miskách s krevním agarem. Misky nesmí být starší než 72 hodin. Lehce se dotkněte 1-3
předpokládaných kolonií Streptokoku A (ty které vykazují charakteristickou beta hemolýzu)
sterilním vatovým tamponem. Vzorek pak dále testujte podle návodu.
PRACOVNÍ POSTUP PŘI PROVEDENÍ KONTROLY KVALITY TESTU
Před testováním nechte součásti soupravy i vzorky vytemperovat na laboratorní teplotu (15 –
30°C). Neotvírejte obal, dokud nebudete připraveni test provést. Temperujte pouze tolik
testovacích souprav, kolik právě potřebujete.
-
Do testovací zkumavky přidejte pět kapek reagencie A (růžová) (1) a 5 kapek
reagencie B (2) (výsledný roztok by měl být světle žlutý).
Okamžitě vložte do zkumavky sterilní vatový tampon.
Rotačním pohybem intenzivně třete vatový tampon o stěnu zkumavky. Rotační pohyb
proveďte nejméně 10x. (3)
Nechte 1 minutu ustát.
Otíráním odběrového tamponu o okraje zkumavky vytlačte z vaty co nejvíce tekutiny.
Odběrový tampon vyhoďte.
-2-
A) Použití blisteru formou kazetového testu:
(1) Vložte 5 kapek reagencie A
(4) Naneste 4
kapky
(2) Vložte 5 kapek reagencie B
(3) Vložte tampon do zkumavky, 10x s ním otočte
a vytlačte přebytečnou tekutinu.
V místě perforace odstřihněte jeden blister ze sady.
Uchopte hliníkový obal za nezatavené konce a tahem
nahoru jej otevřete. Nerozbalujte blister, dokud nejste
připraveni provést test.
Položte blister na rovnou podložku. Pro každé měření
použijte novou pipetu i blister. Pipetou naneste na bílý
okraj přesně 4 kapky (125μl) roztoku z testovací
zkumavky (4). Výsledky odečtěte po 10 minutách.
B) Použití blisteru formou Strip testu (ponořením)
V místě perforace odstřihněte jeden blister ze sady. Uchopte hliníkový obal za
nezatavené konce a tahem nahoru jej otevřete. Nerozbalujte blister, dokud nejste
připraveni provést test.
Blister ponořte bílým okrajem vertikálně do testovací zkumavky s roztokem. Dejte
pozor aby hladina testovaného roztoku nepřesáhla přes šipky, označující testovací
zónu blisteru. Výsledky odečtěte po 10 minutách.
INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
Kontrolní zóna
modrá
červená
Výsledková
zóna
červená
Testovací
zóna
StrepA Test
Pozitivní
Negativní
-3-
Neplatný
Negativní: V bílé kontrolní zóně se objeví pouze jedna modrá linka.
Pozitivní: Kromě modré linky v kontrolní zóně se ve výsledkové zóně objeví také jedna
červená linka.
Neplatné: Výsledky jsou neplatné při úplné absenci modré linky v kontrolní zóně bez ohledu
na přítomnost červené linky. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná
koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte
pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte
svého lokálního dodavatele.
POZNÁMKY K INTERPRETACI VÝSLEDKŮ
Intenzita červeného zbarvení linky ve výsledkové zóně bude kolísat v závislosti na
koncentraci antigenů v testovaném vzorku. Každopádně, tento je test je pouze kvalitativní,
proto z něj nelze určit kvantitu, ani nárůst koncentrace antigenů.
KONTROLA KVALITY
Kontrolní body pracovního postupu jsou zahrnuty v testu:
- Přítomnost modré linky v kontrolní zóně potvrzuje dostatečnou koncentraci vzorku a
správný pracovní postup.
- Při přípravě extrakčního roztoku se po přidání reagencie B změní barva z růžové na
žlutou. Tato barevná změna potvrzuje, že byly reagencie smíšeny správně a že jsou
funkční.
OMEZENÍ
-
-
Test musí proběhnout do 2 hodin od otevření zataveného obalu.
Tento test slouží pouze k pravděpodobné diagnóze streptokokové infekce. Potvrzení
infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a
laboratorní nálezy.
CerTest-VIDITEST Strep A Blister může být použit pouze pro krční výtěry nebo
kolonie odebrané přímo z kultivační misky. Výsledky při použití výtěrů z jiných částí
těla nebo při použití jiných vzorků, jako jsou sliny, hlen nebo moč, nemohou být
uznány platnými. Kvalita testu záleží na kvalitě odebraného vzorku. Vzorky proto
odebírejte s náležitou přesností.
Pomocí tohoto testu nelze rozlišit akutní a chronickou infekci. Pharyngitida může být
způsobena i jinými organismy, než je Streptokok typu A.
Negativní výsledky mohou být získány i z nevhodných vzorků nebo ze vzorků
s nízkou koncentrací antigenu. Doporučujeme potvrdit negativitu testu kultivační
metodou.
-4-
OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY
Ačkoliv se může Streptokoková krční infekce objevit v jakémkoliv věku a v kterémkoliv
ročním období, postihuje zejména děti ve školním věku v zimním a jarním období.
ÚČINNOST
Citlivost
V souladu s instrukcemi k použití této sady byly testovány různé inaktivované kultury
Streptokoku typu A v rozličných ředěních.
Detekční limit: 1,9 x 104 CFU/mL
Detekce Streptokoka typu A CerTest-VIDITEST Strep A Blister vykazovala ve srovnání
s jinými komerčními rychlými testy >99% citlivost.
Specifita
Detekce Streptokoka typu A CerTest-VIDITEST Strep A Blister vykazovala ve srovnání
s jinými komerčními rychlými testy >99% specifitu.
USKLADNĚNÍ A STABILITA
Skladujte v původním zataveném obalu při teplotě +2 až +30°C. Test je funkční do data
exspirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte.
BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ
CerTest Strep A Test je určen pro profesionální diagnostické využití in vitro.
Nepoužívejte po datu exspirace.
Nepoužívejte součásti testu, pokud byl během skladování poškozen hliníkový obal.
Všechny preparáty musí být brány jako potenciálně nebezpečné a musí s nimi být nakládáno
jako s infekčním materiálem. Pro každý vzorek použijte nový odběrový tampon, abyste
zamezili chybám způsobeným kontaminací.
Po použití musí být test vyhozen do příslušného kontejneru s nebezpečným odpadem.
Roztok“A“ obsahuje 2M dusitan sodný – tato složka soupravy je označena symbolem T –
toxický. Vyvarujte se kontaktu tohoto přípravku s kůží a očima. Přípravek nepožívejte ani
nevdechujte, je toxický při požití a zdraví škodlivý při vdechnutí a kontaktu s pokožkou.
Může způsobit vážné podráždění očí.
REFERENCE
1. Dos Santos, Ana Gabriele P., Berezin, Fitan N.; Comparative analysis of clinical and laboratory methods for
diagnosing Streptococcal sore throat. J. Pediatr. (Rio J.) 2005; 81 (1): 23-8
2. Borbeau, Paul P. and Heither, Barbara J.; Use of swab without Transport media for the Gen-Probe Group A
Strep Direct Test. Journal of Clinical Microbiology, July 2004, p. 3207-3211
3. Petts, D.N.; Evaluation of a modified nitrous acid extraction latex agglutination kit for grouping betahemolytic Streptococci and Enterococci. Journal of Clinical Microbiology, Apr. 1995, p.1016-1018.
4. Sheeler, Robert P. et al., Accuracy of Rapid Strep testing in patients who have had recent Streptococcal
Pharyngitis. JABFP, July-August 2002, Vol 15 No 4, p. 261-265.
-5-
POUŽITÉ SYMBOLY
Určeno pro diagnostiku in vitro
Číslo šarže (LOT)
Čtěte návod k použití
Katalogové číslo
Uchovejte v suchu
Obsahuje dostatečné
množství surovin pro <n> testů
Teplotní omezení
Výrobce
Datum exspirace
Pouze pro ověření
Poslední revize tohoto návodu: 03/2009
-6-