Příbalový leták

BILIRUBIN PŘÍMÝ
Jendrassik Grof
Diagnostická souprava pro in vitro fotometrické kvantitativní stanovení přímého bilirubinu v lidském séru,
plasmě.
Dvoučinidlová kapalná souprava k přímému použití
102012
5 x 50 ml
5 x 50 ml R 1
1 x 10 ml R 2
PARAMETRY TESTU
Metoda:
Vlnová délka:
Měření:
Teplota:
Linearita:
Vzorek
Endpoint měření, vzrůst absorbance, Jendrassik-Grof.
555 nm
proti sérovému blanku
20-25°C, 37°C
do 342 µmol/l
sérum nebo plasma
PRINCIP
rozdíl od volného bilirubinu jsou mono a diglukuronidy ve vodném prostředí rozpustné a stanovujeme je jako přímý
bilirubin.Činidla obsahují dimethylsulfoxid (DMSO) a ethylén glykol jako rozpouštědla pro stanovení celkového
bilirubinu(4). Přímý bilirubin reaguje s diazotovanou kyselinou sulfanilovou za vzniku barevného produktu. Intenzita
zbarvení je přímo úměrná koncentraci přímého bilirubinu.
SLOŽENÍ A KONCENTRACE ČINIDEL
Složení:
Konečná koncentrace
R1
Kyselina sulfanilová
Pufry, stabilizátory, plnidla
R 2 (substrát)
Dusitan sodný
Pufry, stabilizátory, plnidla
32.2 mmol/l
109 mmol/l
PŘÍPRAVA ČINIDEL
R 1: činidlo je připraveno k přímému použití..
Pracovní činidlo:
Pracovní činidlo připravíme smícháním 150 dílů činidla R1 a 1 dílu činidla R2. Např.: 12 ml R1 a 0,08 ml R2.
STABILITA A SKLADOVÁNÍ ČINIDEL
Skladování:
Stabilita:
při teplotě 2 – 8°C
po celou dobu exspirace, zabrání-li se kontaminaci originálního balení
Podmínky:
chraňte před světlem!
uzavřete ihned po použití
Pracovní činidlo:
Skladování
20 – 25 °C
Stabilita
8 hodin v tmavé lahvi
Nedodržení uvedených doporučení zbavuje firmu Dialab spol. s r.o. jakékoliv zodpovědnosti.
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 02-09/08
Strana 1 (celkem 4)
VZOREK
Sérum nebo heparinová případně EDTA plasma bez hemolýzy. Vzorky séra, plasmy nebo kalibračních roztoků je
nutno chránit před působením slunečních paprsků i umělého světla a je nutné je zpracovat co nejdříve (do 2 hodin)
po odběru krve. Vzorky jsou stabilní 2 měsíce při
–15°C. Rovněž je důležité dbát na to, aby sérum nebylo chylosní. Chylosita zvyšuje hodnoty bilirubinu.
Odběr doporučujeme provést do zkumavky "VACUETTE" pro sérum červené, nebo "VACUETTE" s heparinem
zelené, případně "VACUETTE" s EDTA fialové.
PROVEDENÍ TESTU
Činidla a vzorky inkubujeme na teplotu stanovení.
Start vzorkem
Pipetujeme:
Blank
Vzorek
Blank standard
Standard
R1
1 ml
1 ml
Pracovní činidlo
1 ml
1 ml
Vzorek
0,1 ml 0,10 ml
Standard
0,10 ml
0,10 ml
Promícháme, inkubujeme 3 minuty při teplotě 30°C nebo 2 minuty
při teplotě 37°C. Do 15 minut změříme absorbance vzorku a
standardu proti příslušnému blanku.
Start substrátem
Pipetujeme:
Blank
Vzorek
Blank standard
Standard
R1
1 ml
1 ml
Vzorek
0,1ml
0,1 ml
Standard
0,1 ml
0,1 ml
R2
0.01 ml
0,01 ml
Promícháme, inkubujeme 3 minuty při teplotě 30°C nebo 2 minuty
při teplotě 37°C. Do 15 minut změříme absorbance vzorku a
standardu proti příslušnému blanku.
KALKULACE (1 CM KYVETA)
A Vz
-----A St
x konc. std. v μmol/l = bilirubin v μmol/l
INTERFERUJÍCÍ LÁTKY
Stanovení neprovádíme v hemolytických a chylosních sérech. Hladinu bilirubinu zvyšují anabolika, erytromycin,
nitrofurantoin, axacilin, kontrastní rtg látky, sulfonamidy, vitaminy B2 a K. Young a spol. (5) uvádějí vliv léků a dalších
látek, které interferují při stanovení bilirubinu.
Hemoglobin interferuje nad 10 g/l.
REFERENĆNÍ ROZMEZÍ *
Normální rozsah
Konjugovaný (přímý) bilirubin:
Nekonjugovaný bilirubin
Celkový bilirubin:
µmol/l
0-3,42
3,42-13,7
3,42-17,1
* Doporučujeme stanovit si vlastní rozmezí normálních hodnot
ANALYTICKÉ PARAMETRY STANOVENÍ
LINEARITA
Stanovení je lineární do hodnoty koncentrace 342 µmol/l. Při vyšší koncentraci bilirubinu ve vzorku, vyšetření opakujeme ze vzorkem ředěným 1 + 1 roztokem NaCl o koncentraci 0,154 mol/l. Změřený výsledek násobíme 2 x.
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 02-09/08
Strana 2 (celkem 4)
REPRODUKOVATELNOST:
V sérii:
n=20
vzorek 1
vzorek 2
vzorek 3
Den ze dne:
n=20
vzorek 1
vzorek 2
vzorek 3
průměr
µmol/l
5,30
43,9
91,1
průměr
µmol/l
5,47
45,3
93,7
s
VK%
0,17
0,34
0,17
3,59
0,58
0,09
s
VK%
0,17
0,34
0,17
3,58
0,60
0,09
POROVNÁNÍ METOD:
Při porovnání Dialab bilirubinu (y) s komerčně dostupným testem (Sclavo) (x) byly získány následující výsledky:
y = 0,989 x + 0,017; r= 0.998.
Bylo použito 55 vzorků
KONTROLA KVALITY
Všechna komerční kontrolní séra, kde je uvedena hodnota pro tuto metodu stanovení.
Doporučujeme používat:
D98481
12 x 5 ml
DIACON N
D98482
12 x 5 ml
DIACON P
KALIBRACE
Všechna komerční kalibrační sera nebo standardy, kde je uvedena hodnota pro tuto metodu stanovení.
Doporučujeme používat:
D98485
3 x 5 ml
DIACAL AUTO
AUTOMATIZACE
Na požádání jsou k dispozici aplikační listy pro běžné typy automatických analyzátorů.
ODPADOVÉ HOSPODÁŘSTVÍ
Prázdný obal zneškodněte v rámci tříděného odpadu v souladu se zákonem o odpadech.
UPOZORNĚNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ
1.
2.
Nepolykejte! Vyvarujte se kontaktu s kůží a očima.
Dodržujte správnou laboratorní praxi.
LITERATURA
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Ehrlich, P., Centr. Klin. Med. 4, 731, 1883.
Van den Bergh, A.A.H. and Snapper, J., Deut. Arch. Klin. Med. 110, 540, 1913.
Van den Bergh, A.A.H. and Muller, P., Biochem 2.77, 90, 1916.
Henry, R.J., editor, Clinical Chemistry, Principles and Technics, p. 1058, Harper and Row, Publishers,
Hagerstown, Maryland, 1974.
Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Testing p. 3.71 – 3.72, AACC Press, Washington,
D.C., 1990.
Tietz N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, p. 940, W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1987.
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 02-09/08
Strana 3 (celkem 4)
Seznam použitých symbolů
Symbol
Význam
Symbol
Význam
Pozor, sledujte průvodní
dokumentaci (příbalový leták)
Použít do ... - poslední den
vyznačeného měsíce (exspirace)
REF
Katalogové číslo
Výrobce
LOT
Číslo šarže
Recyklovatelný materiál
Teplotní omezení (skladujte při ...)
Zlikvidujte v souladu s lokálními
předpisy pro odpady
Cont.
Složení soupravy
Biologická rizika
IVD
Diagnostický zdravotnický
prostředek in vitro
Obsah postačující k provedení <n>
zkoušek
Symboly chemického rizika
DIALAB spol. s r.o.
Nám. Osvoboditelů 1, 153 80 Praha 5
Tel./Fax:257 910 255
257 910 260
257 910 263
e-mail: [email protected]
IČO: 14889200
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 02-09/08
Strana 4 (celkem 4)