Fixace a odběr vzorků - veterinární histopatologická a
Transkript
Fixace a odběr vzorků - veterinární histopatologická a
VETERINÁRNÍ HISTOPATOLOGICKÁ A CYTOLOGICKÁ DIAGNOSTIKA MVDr. Petr Fictum, Ph.D. & MVDr. Miša Škorič, Ph.D. Adresa pro zasílání vzorků: BIOCYT v.o.s., Bieblova 164/22a, 613 00 Brno-Černá Pole tel. +420 737 117 859, +420 606 812 621, email: [email protected] K histopatologickému vyšetření se odebírají excize tkání a orgánů, které nejsou poškozeny autolýzou, mrazem nebo mechanicky. Vzorky změněných tkání by měly zahrnovat i okolní, makroskopicky nezměněnou tkáň. Excize musí být provedeny ostrým nástrojem (nůž, skalpel, žiletka) a při další manipulaci nesmějí být deformovány. Vzorky o velikosti 1,5 x 1,5 x 0,5 cm jsou vhodné pro běžné histopatologické vyšetření. Plošné tkáňové vzorky, které se ve fixační tekutině kroutí a sbalují (např. střevo) je vhodné před vložením do fixační tekutiny napnout na tužší papír. Vkládají se do širokohrdlých uzavíratelných nádobek, obsahující desetinásobný objem fixační tekutiny. Ta musí mít ze všech stran dostatečný přístup k tkáňovému bločku, proto jej někdy podkládáme gázou nebo filtračním papírem. Větší tkáňové excize podléhají v hloubce autolýze a znehodnocují vyšetření. Nejpoužívanější fixační tekutinou je 10% neutrální formalin. Připraví se tak, že se komerčně dodávaný 40% roztok formaldehydu (tj. „100%“ formalin) ředí vodovodní vodou v poměru 1 : 9 , tj. 10% formalin (= 4% formaldehyd). Doba fixace je v tomto roztoku asi 24 - 48 hodin a excize lze v tomto roztoku uchovávat několik měsíců. V ideálním případě je vhodné zasílané biopsie doplnit o detailní anamnestické informace a eventuálně o makroskopické fotografie lézí a RTG snímky, což je důležité zvláště v případě kostních biopsií. Základní informace při odběru kožních biopsií: Výběr vhodného místa: • pokud možno tři stádia chorobného procesu • časnou, vyvíjející se typickou lézi • alopetická léze – velká elipsoidní biopsie • okraje ulcerace • biopsie po vysazení steroidů Technika (punkční, tenkojehelná, aj.): bez holení, čištění, škrabání apod., pouze ostříhat srst minimální traumatizace (ostré nástroje) dostatečně do hloubky včetně podkoží (tuk), kolmo k povrchu a rovné okraje podélná osa elipsovitých biopsií ve směru růstu chlupů před fixací několik vteřin ponechat na podložce epidermis nahoře