Multidrogový test z moči s detekcí naředění/úpravy vzorku

Multidrogový test
One Step Multi-Line Screen Test Panel with Integrated E-Z Split
Key™ Cup (Urine)
Příbalová informace pro testování jakékoliv kombinace následujících drog:
amfetamin, amfetamin 500, amfetamin 300, barbituráty, benzodiazepiny,
benzodiazepiny 200, buprenorfin, kokain, kokain 150, marihuana, marihuana 150,
marihuana 20, metadon, EDDP 300 (metabolit metadonu), EDDP 100 (metabolit
metadonu), metamfetamin, metamfetamin 500, metamfetamin 300,
metylenedioxymetamfetamin, morfin 300, opiáty 2000, oxykodon, fencyklidin,
propoxyfen a tricyklická antidepresiva.
Zahrnuje testy validity vzorku (S.V.T.) na oxidanty/ pyridinium chlorochromát
(OX/PCC), měrnou hmotnost (S.G.), pH, nitrity (NIT), glutaraldehyd (GLUT) a
kreatinin (CRE).
Rychlý jednokrokový screeningový test na simultánní kvalitativní detekci více drog a
metabolitů v lidské moči. Pouze pro použití zdravotníky nebo jinými profesionály jako
in vitro diagnostikum.
ÚČEL POUŽITÍ A SHRNUTÍ
Testy pro stanovení zneužívaných drog v moči jsou k dispozici od jednoduchých
imunostanovení po komplexní analytické postupy. Rychlost a citlivost imunostanovení
z nich dělá nejrozšířenější metodu na screening moči na více zneužívaných látek.
Multi-Drug One Step Multi-Line Screen Test Panel with Integrated E-Z Split Key™
Cup (Urine) je chromatografické imunostanovení na principu vzlínání pro kvalitativní
detekci následujících látek bez potřeby použití přístroje:1
Test
Kalibrátor
Cut-off (ng/ml)
Amfetamin (AMP)
d-amfetamin
1,000
Amfetamin (AMP 500)
d-amfetamin
500
Amfetamin (AMP 300)
Barbituráty (BAR)
Benzodiazepiny (BZO)
Benzodiazepiny (BZO 200)
d-amfetamin
Secobarbital
Oxazepam
Oxazepam
300
300
300
200
Buprenorfin (BUP)
Kokain (COC)
buprenorfin
benzoylekgonin
10
300
Kokain (COC 150)
benzoylekgonin
150
Marihuana (THC)
11-nor-Δ9-THC-9 COOH
50
Marihuana (THC 150)
Marihuana (THC 20)
Metadon (MTD)
11-nor-Δ9-THC-9 COOH
11-nor-Δ9-THC-9 COOH
Metadon
150
20
300
Metadonový metabolit (EDDP
300)
2-etyliden-1,5-dimetyl-3,3difenylpyrolidin (EDDP)
300
Metadonový metabolit (EDDP 100)
2-etyliden-1,5-dimetyl-3,3-
100
Metamfetamin (MET)
difenylpyrolidin (EDDP)
d-metamfetamin
1,000
Metamfetamin (MET 500)
d-metamfetamin
500
Metamfetamin (MET 300)
d-metamfetamin
300
Metylendioxymetamfetamin
(MDMA)
Morfin (MOP 300)
d,l500
metylenedioxymetamfetamin
morfin
300
Opiáty (OPI 2000)
Oxycodon (OXY)
Fencyklidin (PCP)
Propoxyfen (PPX)
Tricyklická antidepresiva (TCA)
morfin
Oxycodon
fencyklidin
Propoxyfen
Nortriptylin
2,000
100
25
300
1,000
Tento test bude detekovat patřičné složky, viz tabulka analytické specificity v tomto
návodu.
Toto stanovení poskytuje pouze předběžný analytický výsledek.
Specifičtější alternativní chemické metody je nutno použít v případě
potvrzení analytického výsledku tohoto testu. Preferovanou konfirmační
metodou je plynová chromatografie/hmotnostní spektrometrie (GC/MS).
Pro jakýkoliv výsledek ohledně zneužití drog je třeba profesionální klinické
posouzení, zejména při pozitivním výsledku.
SHRNUTÍ S.V.T. – testu validity
Každý S.V.T. strip obsahuje chemicky ošetřené reagenční stopy. Tři až pět minut po
aktivaci vzorkem moči se na reagenční stopě objeví zabarvení, které lze srovnávat
s vytištěným vzorníkem.
Srovnání barev poskytne semikvantitativní screening pro jakoukoliv kombinaci
oxidantů/pyridiniumchlorochromátu (PCC), měrné hmotnosti, pH, nitritů,
glutaraldehydu a kreatininu v lidské moči, což může pomoci v posouzení integrity
vzorku moči.
PRINCIP
Multi-Drug One Step Multi-Line Screen Test Panel with Integrated E-Z Split Key™
Cup (Urine) je imunostanovení, založené na principu kompetitivní vazby. Drogy, které
mohou být ve vzorku přítomny, soutěží o vazebná místa na svých specifických
protilátkách se svými konjugáty.
Během testu vzorek moči migruje vzhůru pomocí kapilárního vzlínání. Droga, pokud
je ve vzorku přítomná v koncentraci pod hodnotu své cut-off, nezaplní vazebná místa
na svých specifických protilátkách potažených na částicích. Částice potažené
protilátkami se pak navážou na imobilizovaný drogový konjugát a objeví se viditelná
zbarvená linie v testovacím regionu daného specifického proužku drogy. Zbarvená
linie se neutvoří v testovacím regionu, pokud je hladina drogy nad příslušnou
koncentrací cut-off, jelikož budou zaplněna všechna vazebná místa protilátek
potažených na částicích.
Tedy vzorek, pozitivní na danou drogu, neutvoří zbarvený proužek na své specifické
testovací linii stripu, jelikož je blokován drogou, zatímco vzorek, negativní na drogu a
obsahující menší koncentraci drogy než je hodnota cut-off, vytvoří zbarvenou linii
v testovacím regionu. Jako kontrola postupu slouží zbarvená linie, která se vždy musí
objevit v kontrolním regionu, a která znamená, že byl přidán dostatečný objem
vzorku a proběhlo vzlínání.
PRINCIP S.V.T.
Adulterace znamená falšování vzorků moči za účelem ovlivnit výsledek testu. Použití
adulterativ (příměsí) může způsobit falešně negativní výsledky testu na drogy buď
rušením screeningového testu a/nebo rozložením drogy přítomné v moči.
Zředění také může být důvodem falešně negativního výsledku testu na drogu.
Nejlepší cestou, jak testovat adulteraci nebo zředění, je stanovit určité charakteristiky
moči, jako je pH a měrná hmotnost, a detekovat přítomnost oxidantů/PCC, měrnou
hmotnost, pH, nitrity, glutaraldehyd a kreatinin ve vzorku moči.
Oxidanty/PCC (pyridinium chlorochromát) testuje přítomnost oxidačních činidel,
jako je bělidlo a peroxid vodíku. Pyridinium chlorochromát je běžně používané
adulterans. 2 Normální lidská moč by neměla obsahovat oxidanty ani PCC.
Měrná hmotnost zjišťuje zředění vzorku. Normální rozmezí je od 1.003 do 1.030.
Hodnoty mimo toto rozmezí mohou být důsledkem zředění vzorku nebo příměsí.
pH testuje přítomnost kyselých nebo alkalických příměsí v moči. Normální hodnoty
pH by měly být v rozmezí od 4.0 do 9.0. Hodnoty mimo toto rozmezí mohou
znamenat, že byly do vzorku dány příměsi.
Nitrity testují běžně používaná komerční adulterativa, jako je Klear nebo Whizzies.
Fungují tak, že oxidují hlavní metabolit kanabinoidů THC-COOH.3 Normální moč by
neměla obsahovat žádnou stopu nitritů. Pozitivní výsledky obecně indikují přítomnost
adulterativ.
Glutaraldehyd testuje přítomnost aldehydu. Příměsi, jako je UrinAid a Clear
Choice, obsahují glutaraldehyd, který může způsobit falešně negativní výsledky
screeningu přerušením enzymové reakce u některých imunostanovení.2
Glutaraldehyd není normálně v moči; tudíž detekce glutaraldehydu ve vzorcích moči
je obecnou známkou příměsi.
Kreatinin je odpadní produkt kreatinu, aminokyseliny, obsažené ve svalové tkáni a
nacházející se v moči. 1 Testovaná osoba se může pokusit zmařit test vypitím velkého
množství vody nebo diuretika, jako jsou bylinné čaje na „propláchnutí“.
Kreatinin a měrná hmotnost jsou dva způsoby, jak ověřit zředění a vypláchnutí, které
jsou nejčastěji použitými mechanizmy pro ovlivnění testování na drogy. Nízký
kreatinin a měrná hmotnost může indikovat zředění moči. Absence kreatininu (< 5
mg/dl) je známkou, že vzorek neodpovídá lidské moči.
REAGENCIE
Každý test v testovacím panelu obsahuje myší monoklonální protilátky na částicích a
odpovídající konjugáty droga-protein. Kozí protilátky jsou obsaženy jako kontrolní
linie.
REAGENCIE na S.V.T.
stopa
reakční indikátor
Oxidanty/PCC
měrná hmotnost
pH
nitrity
glutaraldehyd
kreatinin
0.36%
0.25%
0.06%
0.07%
0.02%
0.04%
pufry a nereaktivní
ingredience
99.64%
99.75%
99.94%
99.93%
99.98%
99.96%
UPOZORNĚNÍ
Pouze pro zdravotníky a ostatní profesionály jako in vitro diagnostikum.
Nepoužívejte po datu expirace.
ento testovací panel by měl zůstat v uzavřeném původním obalu až těsně do
použití.
potenciálně nebezpečný materiál a
mělo by se s nimi zacházet jako s infekčním materiálem.
testovací panel by měl být likvidován podle místních předpisů.
UCHOVÁVÁNÍ A STABILITA
Uchovávejte v původním obalu, buď za pokojové teploty nebo v ledničce (2-30°C).
Testovací panel je stabilní do data expirace na obalu. Musí zůstat uzavřený v obalu
až těsně do použití. NEZMRAZUJTE. Nepoužívejte po datu expirace.
ODBĚR A PŘÍPRAVA VZORKU
Moč
Vzorek moči musí být odebrán do čistého a suchého kontejneru. Může být použita
moč odebraná kdykoliv během dne. Vzorky moči, vykazující viditelné sraženiny, musí
být centrifugovány, filtrovány nebo se nechají usadit, aby vznikl čirý supernatant pro
testování.
Uložení vzorku
Vzorky moči mohou být uloženy při 2-8°C až 48 hodin před testováním. Pro delší
dobu mohou být zmrazený pod -20°C. Zmrazené vzorky musí být před testováním
úplně rozmraženy a dobře promíchány. Pokud testujeme také S.V.T., nemělo by
uložení vzorků moči do testování přesáhnout 2 hodiny za pokojové teploty nebo 4
hodiny v chladu. Pro nejlepší výsledek by měl být vzorek testován hned po odběru.
MATERIÁLY
Materiály dodané
multidrogovými panely
líč
barevné stupnice (případně)
říbalová informace
Materiál nedodaný
POKYNY K POUŽITÍ
Nechte testovací panel, vzorek moči a/nebo kontroly vytemperovat na
pokojovou teplotu (15-30°C) před použitím.
1. Musí dosáhnout teploty místnosti, než obal otevřete. Vyjměte kalíšek
z neporušeného obalu a co nejdříve ho použijte.
2. Stáhněte chránítko a odstraňte víčko, odeberte vzorek do kalíšku a zabezpečte
ho přitisknutím všech tří rohů.
3. Ověřte si štítek s teplotou (Temp Label) do 4 minut po odběru vzorku. Zelená
barva indikuje teplotu vzorku moči. Vlastní rozmezí pro neadulterovanou moč
je 32-38°C.
4. Ověřte těsnost uzávěru, datum a přiložený bezpečnostní štítek přelepte přes
uzávěr.
5. Vyjměte jeden klíč z kitu, dejte kalíšek na rovný povrch a zatlačte klíč do jamky
kalíšku. Začněte měřit čas.
6. Odloupněte štítek chránící výsledky testu. Odečtěte adulterační strip v
rozmezí 3 a 5 min.
7. Srovnejte barvy na adulteračním stripu s přiloženým vzorem barev. Pokud
výsledek indikuje adulteraci, neinterpretujte výsledek testu na drogy. Buď testujte
znovu tuto moč nebo odeberte jiný vzorek.
8. Odečítejte strip s drogami po 5 minutách. Výsledky drogového testu
zůstanou na stripu stabilní až 60 minut.
1) Dejte kalíšek na rovný povrch, vložte klíč a zatlačte.
2)Sloupněte štítek, který chrání výsledky.
3)Interpretujte adulteraci za 3-5 min. Porovnejte s přiloženým vzorem
interpretace.
4) Počkejte 5 minut do odečtu výsledků na drogy.
5) Interpretujte výsledky na drogy po 5 minutách.
INTERPRETACE VÝSLEDKŮ
(Prohlédněte si ilustrace výše.)
NEGATIVNÍ:* Zbarvená linie v kontrolním regionu (C) a zbarvená linie
v testovacím regionu (T) pro danou drogu indikuje negativní výsledek. To
znamená, že je koncentrace drogy ve vzorku moči pod danou hladinu cut-off
u této specifické drogy.
*POZN.: Odstín barvy se v testovacím regionu (T) může lišit, ale je třeba považovat
výsledek za negativní i v případě, kdy je barevná linie velmi slabá.
POZITIVNÍ: Zbarvená linie v kontrolním regionu (C), ale není žádná linie
v testovacím regionu (T) pro danou drogu. To indikuje pro specifickou
drogu pozitivní výsledek. To znamená, že je koncentrace drogy ve vzorku moči
nad hodnotou cut-off u této drogy.
NEVALIDNÍ: Kontrolní linie se neobjeví. Nedostatečný objem vzorku nebo
nesprávná technika postupu jsou nejčastějšími příčinami pro tuto chybu kontrolní
linie. Projděte si znovu postup a opakujte test s použitím nového testu. Pokud
problém přetrvává, nepokračujte v testování a kontaktujte svého distributora.
INTERPRETACE S.V.T. / ADULTERATIV
(Porovnejte s barevnou stupnicí)
Semikvantitativní výsledky se získají vizuálně srovnáním barevného políčka na stripu
s natištěnými barevnými poli na vzorníku. Není potřeba žádný přístroj.
KONTROLA KVALITY
Kontrola postupu je zahrnuta v testu. Objevuje se zbarvená linie v regionu kontrolní
linie (C), která je považována za vnitřní kontrolu postupu. Potvrzuje, že byl přidán
dostatečný objem vzorku, proběhlo vzlínání a byla použita správná technika.
Kontrolní standardy nejsou dodávány s kitem; nicméně, je doporučeno podle zásad
SLP potvrdit test pozitivními a negativními kontrolami a ověřit si postup testu a jeho
provedení.
OMEZENÍ
1. Test Multi-Drug One Step Multi-Line Screen Test Panel with Integrated E-Z Split
Key™ Cup (Urine) poskytuje pouze předběžný výsledek. Pro potvrzení je třeba
provést specifičtější chemické metody. Především plynovou
chromatografii/hmotnostní spektrometrii (GC/MS), které slouží jako konfirmační
metody. 4,5
2. Je možné, že technická nebo procedurální chyba, stejně jako jiné interferující
substance v moči, způsobí chybné výsledky.
3. Adulterativa, jako jsou bělidla a/nebo kamenec, ve vzorcích moči mohou působit
chybné výsledky bez ohledu na analytickou metodu. Pokud existuje podezření na
adulteraci, měl by být test opakován s jiným vzorkem moči.
4. Pozitivní výsledek indikuje přítomnost drogy nebo jejího metabolitu, ale neukazuje
na stupeň intoxikace, způsob podání nebo koncentraci v moči.
5. Negativní výsledek nemusí nezbytně znamenat moč bez drog. Negativní výsledky
mohou být dosaženy, pokud je droga přítomná pod hladinou cut-off testu.
6. Tento test nerozlišuje mezi drogami zneužívanými a určitými léčivy.
7. Pozitivní výsledek může vzniknout u určitých potravin nebo doplňků stravy.
OMEZENÍ S.V.T. ADULTERACE
1. Testy adulterace, zahrnuté v tomto produktu, jsou míněny jako pomůcka při
zjištění abnormálních vzorků.
Co se týče komplexnosti, tyto testy nepředstavují “all-inclusive” variantu možných
adulterací.
2. Oxidancia/PCC: Normální lidská moč by neměla obsahovat oxidanty nebo PCC.
Přítomnost vysokých hladin antioxidantů ve vzorku, jako je kyselina askorbová, může
vést k falešně negativním výsledkům na oxidanty/PCC .
3. Měrná hmotnost: Zvýšené hladiny proteinu v moči mohou způsobit abnormálně
vysokou specifickou hmotnost.
4. Nitrity: Nitrity nejsou normální složkou v lidské moči. Nicméně, mohou při nálezu
v moči indikovat infekce močových cest nebo bakteriální infekce. Hladiny nitritů > 20
mg/dl mohou způsobit falešně pozitivní výsledky glutaraldehydu.
5. Glutaraldehyd: Normálně se v moči nenachází. Nicméně, určité metabolické
abnormality, jako je ketoacidóza (hladovění, nekontrolovaný diabetes nebo
vysokoproteinová dieta) mohou interferovat s tímto testem.
6. Kreatinin: Normální hladiny kreatininu jsou mezi 20 a 350 mg/dl. Velmi vzácně
mohou určité choroby ledvin vykazovat ředění moči.
CHARAKTERISTIKY PROVEDENÍ
Přesnost
Vzájemné srovnání bylo provedeno s použitím Multi-Drug One Step Multi-Line Screen
Test Panel with Integrated E-Z Split Key™ Cup (Urine) a komerčně dostupnými
rychlými testy na drogy. Testování bylo provedeno asi na 300 vzorcích dříve
odebraných od subjektů pro testování na screening drog. Předpokládané pozitivní
výsledky byly potvrzeny pomocí GC/MS. Výsledky ukazuje tabulka:
% shody s komerčním kitem
* POZN.: Komerční kit nebyl dostupný pro srovnávací testování.
** POZN.: BUP byl srovnáván se subjektem udávaným buprenorfinem.
% shody s GC/MS
*POZN.: BUP byl založen na datech LC/MS namísto GC/MS.
**POZN.: TCA byl založen na datech HPLC namísto GC/MS.
Analytická citlivost
Sdružené vzorky moči bez přítomnosti drog byly smíchány s drogami na koncentrace
±50% cut-off a ±25% cut-off. Výsledky jsou shrnuty níže.
Analytická specificita
Následující tabulka ukazuje koncentrace složek (ng/ml), které jsou detekovány jako
pozitivní v moči pomocí Multi-Drug One Step Multi-Line Screen Test Panel with
Integrated E-Z Split Key™ Cup (Urine) za 5 minut.
Křížová reaktivita
Studie byla založena na stanovení křížové reaktivity testu se složkami buď v moči bez
drog nebo v moči pozitivní na :
amfetamin, amfetamin 500, amfetamin 300, barbituráty, benzodiazepiny,
benzodiazepiny 200, buprenorfin, kokain, kokain 150, marihuanu, marihuanu 150,
marihuanu 20, methadon, EDDP 300, EDDP 100, metamfetamin, metamfetamin 500,
metampftamin 300, metylenedioxymetamfetamin, morfin 300, opiáty 2000,
Oxycodon, fencyklidin, propoxyfen, tricyklická antidepresiva.
Následující složky nevykazovaly žádnou křížovou reaktivitu, pokud byly testovány s
Multi-Drug One Step Multi-Line Screen Test Panel with Integrated E-Z Split Key™
Cup (Urine) za pokojové teploty a při koncentraci 100 µg/ml.
Složky bez křížové reakce
Acetofenetidin, l-kotinin, ketamin, d-pseudoefedrin, N-acetylprokainamid, kreatinin,
ketoprofen, chinidin, kyselina acetylosalicylová, deoxykortikosteron, Labetalol, chinin,
Aminopyrin, dextrometorfan, Loperamid, kyselina salicylová, amoxicilin, Diclofenac,
Meprobamat, serotonin, ampicilin, Diflunisal, metoxyfenamin, sulfametazin,Laskorbová kyselina, digoxin, metylfenidát, Sulindac, apomorfin, difenhydramin,
kyselina nalidixinová, tetracyklin, aspartam, etyl-p-aminobenzoát, Naproxen,
tetrahydrokortison, atropin, β-estradiol, niacinamid, 3-acetát, kyselina benzilová,
estron-3-sulfát, nifedipin, tetrahydrokortison, kyselina benzoová, erytromycin,
noretindron, tetrahydrozolin, bilirubin, fenoprofen, noscapin, thiamin, d,lbromfeniramin, Furosemid, d,l-octopamin, Thioridazin, kofein, kyselina gentisová,
kyselina šťavelová d,l-tyrosin, kannabidiol, hemoglobin, kyselina oxolinová,
tolbutamid, chloralhydrát, hydralazin, oxymetazolin, Triamterene, chloramfenikol,
hydrochlorothiazid, papaverin, trifluoperazin, chlorothiazid, hydrokortison, penicilin-G,
Trimethoprim, d,l-chlorfeniramin, o-hydroxyhippurová kyselina, perfenazin, d,ltryptofan, Chlorpromazin, 3-hydroxytyramin, Phenelzine, kyselina močová,
cholesterol, d,l-izoproterenol, Prednison, Verapamil, Clonidine, Isoxsuprine, d,lpropanolol, Zomepirac, kortison.
LITERATURA
1. Tietz NW. Textbook of Clinical Chemistry. W.B. Saunders Company. 1986; 1735
2. Cody B, J.T., “Specimen Adulteration in drug urinalysis. Forensic Sci. Rev., 1990,
2:63.
3. Tsai C, S.C. et.al., J. Anal. Toxicol. 1998; 22 (6): 474
4. Baselt RC. Disposition of Toxic Multi-Drugs and Chemicals in Man. 2nd Ed.
Biomedical Publ., Davis, CA. 1982; 488
5. Hawks RL, CN Chiang. Urine Testing for Drugs of Abuse. National Institute for
Drug Abuse (NIDA), Research Monograph 73, 1986
Barevná škála SVT/adulterantiva:
Abnormal
OX PCC
NIT
Normal
S.G.
GLUT
pH
CRE
abnormální
oxidanty/pyridinium chlorochromát
nitrity
normální
měrná hmotnost
glutaraldehyd
pH
kreatinin
MM 21.6.11