ORAC - Gano Tea SOD

UNIVERSITAS MEDICA VARSOVIENSES,
1809. SALUTI PUBLICAE
Varšavská lékařská univerzita ve Varšavě
Ústav fyzikální chemie, Farmaceutická fakulta,
Ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa, tel/fax : (22) 5720-95
________________________________________________________________
VÝZKUM ANTIOXIDAČNÍHO OBJEMU PROKUKTU
GANO Tea SOD
fluorescenční metodou, test ORAC-FL
Produkt
GANO Tea SOD
Provedené výzkumy
Test na schopnost odstraňování volných radikálů ROO – metodou ORAC-FL.
1. Popis použité metody výzkumu schopnosti odstraňování volných radikálů.
U metody ORAC-FL je měřen zánik fluorescence fluoresceinů v důsledku
reakce s volnými radikály generovanými důsledkem termického rozkladu
azoiniciátora AAPH (2,2´- azobist (2- amidinopropane) dihydrochloride).
Přítomnost antioxidantů chrání fluoresceiny před oxidací a tímto opožďuje
zánik fluoresceinů [1].
Předností této metody je to, že bere na zřetel současně jak míru, tak čas
inhibice oxidace modelové látky (fluoresceinu) radikály a také využití
peroxidových radikálů vyskytujících se v živých organizmech.
1
Intenzita fluorescence je registrována v časové funkci za přítomnosti
antioxidantu a bez jeho přidání a rozdíl pole plochy pod oběma křivkami je
mírou objemu antioxidačního vzorku. Hodnota ORAC je vyjádřena ve vztahu
ke standardu, jakým je Trolox (rozpustný ve vodě analog E vitamínu) – ty jsou
určovány na základě vzorové křivky, provedené pro různou míru koncentrace
Troloxu a vyjádřené ekvivalenty Trolosu (TE), obvykle v mikromolech Troloxu
na gram suché hmoty nebo litr v případě tekutých vzorků. Současně byly
shromážděny údaje mnoha druhů potravinových produktů (ovoce, zelenina,
bylin, koření a jiné). [2,3].
[1] Ou B. Hampsch-Woodill M., Pr[2] X.Wu et al. Development of a database
for total antioxidant capacity in fouds: a preliminary study. Journal of food
Composition and Analysis 17. (2004) 407-422
{2} X. Wu et al. Development of a diabase for total antioxidant capacity in
fous: a preliminary stady. Journal of Food Composition and Analysis 17 (2004)
407 – 422
[3] Oxygen Radical Absorbance Capiacitz Selected Foods – 2007; Nutrient Data
Laboratory, Agricultural Research Service, United States Department of
Agriculture, November 2007.
2. Provedení měření
Charakteristika měření
Měření bylo provedeno na luminiscenčním fluorescenčním spektrometru
Perkin-Elmer LS 55,
Parametry měření:
• Vlnová délka nabuzující radiace 485 mm
• Vlnová délka měřené emitované radiace 520 mm
• Celková doba měření 90 minut
• Interval mezi jednotlivými měřeními: 1 minuta
• Teplota měření 37°C
2
Postup:
Byly připraveny čerstvé fluorescenční roztoky (80 nM) a AAPH (40 nM) v pufru PBS s
7,4 pH. Do kyvety pro fluorescenční měření bylo odebráno 1800 µl fluorescenčního
roztoku a 300 µl pufru (pro měření poměrné křivky, bez přidání antioxidantu) nebo
zkoumaného produktu “Gano Tea SOD”, připraveného v souladu s informací na
obalu, 300 krát zředěného. Po 10 minutách termostatování při teplotě 37°C bylo
přidáno 900 µl roztoku AAPH a začalo měření fluorescence.
Měření se třikrát opakovalo.
3. Výsledky
Plocha povrchu pod křivou zániku fluorencence byla propočtená s využitím
programu MS Excel a rozdíl mezi polem pod registrovanou křivkou za
přítomnosti zkoumaného preparátu a poměrné křivky byl poměřen s vzorovou
křivkou.
Preparát:
Gano Tea SOD – hodnota ORAC-FL: 6269 TE µmol v přepočtu
na porci nápoje (200 ml).
Což odpovídá cca 45 hodnotám ORAC-FL denní dávky C vitamínu (75 mg).
měření provedla
Dr. Ing. Joanna Celińska
Vedoucí Ústavu fyzikální chemie
Prof. n. Dr. hab chem Iwona Wawer
3