Kazeta - QuickSeal

Negativní kontrola: Streptokok C, 0,09% azid sodný
Sterilní tampóny pro výtěr z krku.
Extrakční zkumavky a špičky pro přípravu vzorku.
Stojánek, návod k použití
• SKLADOVÁNÍ A STABILITA REAGENTŮ
Skladování:
2 – 30°C, nesmí zmrznout!
Stabilita:
Kazeta uzavřená v originálním obalu do data
exspirace
Po otevření obalu musí být kazeta ihned
použita.
• SKLADOVÁNÍ A STABILITA VZORKŮ
STREPTOKOK A
Kazeta
pro rychlý imunochemický kvalitativní průkaz
streptokoků A ve výtěru z krku. Je určen pro diagnostiku
infekcí vyvolaných streptokokem A.
• KAT. Č. / VEL. BAL.
Kat. č.
STA-S23
Vel. bal.
20 ks kazet jednotlivě balených,
20 extrakčních zkumavek s kapacím uzávěrem,
20 sterilních tampónů na odběr vzorku (výtěr),
1 stojánek na reagenty.
• KLINICKÝ VÝZNAM
Většina bakteriálních infekcí horních cest dýchacích (tonsilitis,
faryngitis,
spála)
je
způsobena
beta-hemolytickými
streptokoky skupiny A. Včasná diagnostika původce a zahájení
léčby antibiotiky vede ke snížení výskytu komplikací jako např.
revmatické horečky nebo poststreptokokové glomerulonefritidy.
Konvenční metody detekce původce těchto infekcí jsou
založeny na mikrobiologickém průkazu, který trvá 24-48 hodin.
Vývoj imunologických metod průkazu s možností provedení
přímo v ordinaci lékaře umožňuje okamžité zahájení léčení.
• PRINCIP
Tato metoda je založena na průkazu přítomnosti barevné linie
(proužku) v testační oblasti. Na membráně jsou navázány
immobilizované protilátky proti streptokokům A. Vzorek
reaguje s polyklonální protilátkou konjugovanou s barevnými
částicemi umístěnou v oblasti, kde se nanáší vzorek. Směs pak
migruje po membráně a reaguje s látkami, které jsou zde
vázány. Pokud je ve vzorku přítomen streptokok A, vytvoří se
v testační zóně barevná linie (proužek). Výsledek testu je
pozitivní. Pokud se proužek nevytvoří, znamená to negativní
výsledek testu.
Test probíhá následovně:
Ze vzorku (výtěr z krku) je extrahován antigen (streptokoky
skupiny A) pomocí reagentů 1 a 2 a je nanesen na kazetu, kde
reaguje s barevnou protilátkou navázanou na koloidní zlatodochází ke vzniku komplexu antigen-protilátka.
Kazeta obsahuje navíc kontrolní zónu, kde se tvoří linka
(proužek), která signalizuje, že test byl proveden správně (že
bylo naneseno správné množství vzorku, že reakční směs
správně postupovala po membráně a že je kazeta funkční).
Jako vzorek použijte výtěr z krku (provedený sterilním
tampónem, který je součástí soupravy). Výtěr proveďte
obvyklým postupem – setřete zadní larynx, mandle a další
zanícená místa. Nedotýkejte se jazyka a zubů. Vyšetření by
mělo být provedeno ihned. Pokud chcete ještě provést
mikrobiologické vyšetření, po provedení výtěru nejprve
tampón otiskněte na agar (5% ovčí krev) a pak jej použijte
na provedení tohoto testu. Extrakční činidla totiž zabíjejí
bakterie a jakmile provedete extrakci, nelze tampón použít na
mikrobiologické vyšetření. Výrobce doporučuje, aby vyšetření
bylo provedeno co nejdříve po výtěru. Pokud to není možné,
vložte tampón do sterilní suché zkumavky, pevně uzavřete a
uchovávejte v ledničce. Nezamrazujte!!! Tampón může být
uchován v ledničce 24 hodin. Před provedením testu je nutné
odebraný vzorek vytemperovat.
• POSTUP STANOVENÍ
Všechny komponenty nechte vytemperovat.
Nedotýkejte se tampónem lahviček s reagenty, aby nedošlo
ke kontaminaci.
EXTRAKCE:
do extrakční zkumavky kápněte 4 kapky reagentu A
přidejte 4 kapky reagentu B a obsah zkumavky
promíchejte. Pak přitiskněte tampón ke stěně extrakční
zkumavky a krouživým pohybem jím pohybujte po
obvodu tak, aby se do něj tekutina vsákla.
Nechte stát 1-15 minut při pokojové teplotě, pak
přitiskněte tampón ke stěně zkumavky tak, aby z něj co
nejvíce tekutiny vyteklo. Zkumavku uzavřete kapacím
uzávěrem a obsah dobře promíchejte.
3 kapky vzorku (150 ul) z extrakční zkumavky kápněte
do kulatého otvoru kazety (S).
Dejte pozor, aby se do jamky S nedostaly
vzduchové bublinky. Do testační zóny nedávejte
žádné tekutiny!!!
Po nanesení vzorku se začne posunovat po membráně
barevná zóna. Po 5 minutách odečtěte výsledek testu.
Po 10 minutách již výsledek testu není směrodatný.
•
INTERPRETACE VÝSLEDKU
Negativní výsledek:
1 barevná linka v kontrolní zóně (C).
Žádná linka v zóně T
Pozitivní výsledek:
• SLOŽENÍ REAGENTŮ:
Reagent A: 0,1 M nitrit sodný 7ml
T: toxický
R25: toxický při požití
Reagent B: 0,4 M kyselina octová (7ml)
Pozitivní kontrola: Streptokok A, 0,09% azid sodný
2 barevné linky - 1 v kontrolní zóně C,
1 v testační zóně T.
Intenzita barevné linky není směrodatná,
jedná se o kvalitativní průkaz. Proto i
slabá linka má být hodnocena jako
pozitivní.
01/2009 ver.01
Diagnostická senzitivita: 97,6% (95%Cl, 93,8 % - 99,4%)
Diagnostická specificita: 97,5% ( 95% Cl, 93,7 % - 99,3%).
Neplatný výsledek:
Žádná linka v kontrolní zóně (C) znamená
znehodnocení testu. Výsledek je neplatný a
je nutné vyšetření opakovat.
• KONTROLA KVALITY
Každá kazeta má kontrolní zónu - vznik barevné linky v zóně
ukazuje na správné provedení testu a správnou funkci kazety.
SLP (správná laboratorní praxe) doporučuje kontrolu pomocí
kontrolního materiálu. Jde o pozitivní kontrolu, která obsahuje
teplem inaktivované streptokoky A a negativní kontrolu
s obsahem inaktivovaných streptokoků jiné skupiny.
Provedení kontroly:
Do extrakční zkumavky dejte 4 kapky reagentu A a 4 kapky
reagentu B. Obsah promíchejte.
Promíchejte také obsah lahvičky s pozitivní nebo negativní
kontrolou.
Do zkumavky přidejte 1 kapku kontroly.
Sterilním tampónem obkružte stěny zkumavky a tampón
nechte ve zkumavce 1 minutu. Pak tekutiny z tampónu vytlačte
jeho přitisknutím ke stěně zkumavky, tampón zahoďte a dále
pokračujte jako při vyšetření vzorku pacientů, tj. naneste do
jamky S a po 5 minutách odečtěte výsledek.
2)
3)
4)
5)
6)
• POZNÁMKY
-
pouze pro použití in vitro
pouze pro profesionální použití
pouze pro jednorázové použití
nepoužívejte reagenty různých šarží souprav
nezaměňujte víčka reagentů A a B
nepoužívejte proexpirované soupravy
během provádění testu nekuřte, nejezte a nepijte
nepoužívejte kazetu, pokud má poškozený obal
nepoužívejte k výtěru tampón, který má poškozený obal
používejte pouze dakronové tampóny nebo tampóny z umělého
hedvábí s plastovou tyčinkou, ne bavlněné či kalcium alginátové
tampóny s dřevěnou tyčinkou
extrakční reagent A je jedovatý, pokud je spolknut
pozitivní a negativní kontroly obsahují azid sodný, který může
s mědí a olovem tvořit výbušné směsi
před použitím všechny součásti soupravy vytemperujte
nedávejte vzorek do reakční zóny testu
nedotýkejte se reakční zóny, mohlo by dojít ke kontaminaci
použité kazety považujte za potenciálně infekční a likvidujte je
v souladu s vašimi bezpečnostními předpisy
-
• LITERATURA
• OMEZENÍ
1)
Studie v ordinacích praktických lékařů :
Evaluace byla provedena ve 3 ordinacích praktických lékařů,
kteří analyzovali negativní kontrolu a vzorky pacientů s
nízkou pozitivitou a střední pozitivitou.
Každý vzorek byl testován 5x po dobu 5 po sobě následujících
dní. Výsledky byly shodné ve více než 99%.
Přesnost testu závisí na správném odběru vzorku. Pokud je
výtěr proveden nesprávně nebo je tampón nesprávně a
dlouho skladován, může být výsledek falešně negativní.
Negativní výsledek dostaneme také těsně po začátku infekce,
kdy se ještě antigen nevyskytuje v dostatečné míře. V tomto
případě je lepší provést ještě mikrobiologické vyšetření.
Test nerozliší Streptokoky A, které jsou původcem infekce a
ty, které jsou přítomny u bacilonosičů.
V přítomnosti velkého množství zlatých stafylokoků ve vzorku
nebo při kontaminaci tampónu těmito bakteriemi je výsledek
testu falešně positivní.
Infekce dýchacích cest včetně pharyngitis, mohou být
vyvolány i jinými typy streptokoků než skupiny A.
Jako u všech diagnostických testů, konečná diagnóza musí
být stanoven lékařem na základě klinického stavu a výsledků
všech provedených vyšetření.
Analytická senzitivita (citlivost):
Dolní detekční limit: 1,5 x 105 bakterií
Specificita: Streptokoky skupiny A:
SS-091, SS-410, SS-492, SS-496, SS-633, SS-634, SS-635,
SS-721, SS-754, SS-799 , ATCC 19615.
1.
Facklam, R.R. and Carey R.B., Streptococci and Aerococci, Manual of
Clinical Microbiology, 4 th ed., Lennette, E.H., Balows, A., Hausler, W.J.
and Shadomy, H.J. (eds), American Society for Microbiology, 1985,
PP154-175.
Levinson, M.L. and Frank, P.F., Differentiation of Group A from other
Beta Hemolytic Streptococci with Bacitracin, J. Bacteriol., 69,284287(1995).
Edwards, e.a., phlillips, i.a., and Suiter, W.C., Diagnosis of Group A
Streptococcal Infections Directly from throat secretions, J. Clin. Micro.
15, 481-483 (1982).
Gupta, R., Talwar, G. P. And Gupta, S.K., Rapid Antibody Capture Assay
for Detection of Group A Streptococci Using Monoclonal Antibody and
Colloidal Gold-Monospecifi c Polyvalent Antibody Conjugate, J.
Immunoassay, 13, 441-445 (1992).
Ross, P.W., Throat Swabs and Swabbing Technique, The Practitioner,
207, 791-796 (1971).
2.
3.
4.
5.
6.
Lauer, B.A., Rellar, L.B. and Mirrett, S., Effect of Atmosphere and
Duration of Incubation on Primary Isolation of Group A Streptococci from
Throat Cultures, J. Clin. Micro., 17, 338-340 (1983).
Šarže
Exspirace
Byla zjišťována i zkřížená reakce s níže uvedenými bakteriemi
v množství 1 x 108
Pouze pro použití in vitro
Bordetella pertusis
Candida albicans
Corynebacterium diphtheriae
Escherichia coli
Streptokoky skupiny B
Streptokoky skupiny C
Streptokoky skupiny D
Streptokoky skupiny E
Streptokoky skupiny F
Streptokoky skupiny G
Haemophilus parahaemolyticus
Moraxella catarrhalis
Neisseria gonohhreae
Neisseria lactima
Neisseria meningitidis
Skladovat při pokojové teplotě
Neisseria subflava
Proteus vulgaris
Pseudomonas aeruginosa
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saphrophyticus
Streptococcus bovis
Streptococcus faecalis
Streptococcus faecium
Streptococcus mitis
Streptococcus mutans
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus salivarius
Streptococcus sanguis
Neisseria sicca
Pokud byly ve vzorku přítomny výše uvedené bakterie, byl
výsledek testu negativní.
Na několika klinikách byla také provedena paralelní vyšetření
vzorků pomocí tohoto testu a mikrobiologického vyšetření.
Výtěr z krku u dětí i dospělých byl vyšetřen na krevním agaru
a pomocí tohoto testu.
Korelační studie: rapid test vs. kultivace
tento test
kultivace
+
-
+
82
4
86
2
156
158
Celkem
84
160
244
Pouze pro jednorázové použití
MK Bio GmbH
Robert Bosch Breite 23
D-37079 Göttingen
Germany
www.mk-bio.com
Dovozce pro ČR a SR:
DOT®diagnostics, s.r.o.
Ruzyňská 519/16
CZ - 161 00 Praha 6
Tel.: +420 235 318 612
Fax: +420 235 318 614
e-mail: [email protected]
Distribuce a prodej:
QUICKSEAL INTERNATIONAL, s.r.o.
nám. T.G.M. 573
CZ – 290 01 Poděbrady
Tel.: 602 465 542, 723 909 290
e-mail: [email protected]
www.quickseal.eu
01/2009 ver.01