M30 CytoDEATH™ Biotin

S mrtvými buňkami se ještě musí počítat!
Uchovávejte při 2-8°C
Pouze pro výzkum. Není určeno pro diagnostické účely. POUZE PRO POUŽITÍ IN VITRO!
M30 CytoDEATH™ Biotin
200 testů (Kat. číslo. 10750)
Myší monoklonální protilátka (klon M30)
Pro detekci neo-epitopu M30 na kaspázou naštepeném Cytokeratinu 18
1. Popis produktu
Název:
Klon:
Izotyp:
Imunogen:
Epitop:
Výhody
M30 CytoDEATH™ Biotin
M30
IgG2b
Fragmenty Cytokeratinu 18 izolované ze supernatantu
buněčné linie lidského karcinomu WiDr CCL218.
CK18 fragment aa284-396
1.1 Složení
Signál z buněk je trvalý,
od časné až do pozdní fáze
apoptózy
Vyšší citlivost
Neo-epitopu CK18 je hromadící se
produkt vytvářený působením jen několika aktivovanými molekulami kaspáz
Test není závislý na aktivaci
jedné určité kaspázy
Cytokeratin 18 je in vivo štěpený
několika druhy kapsáz, včetně
kaspázy-3, 6, 7 a 9.
Jednozančný výsledek
Apoptotické buňky jsou snadno odlišitelné od živých či nekrotických buněk.
Bezbarvý roztok. 10 µg monoklonální protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin
ve 200 µl PBS s přídavkem 0.1 % BSA, PEG, sacharózy a 0.09 % azidu sodného.
1.2 Specifita
Protilátka M30 CytoDEATH™ Biotin je doporučená pro detekci formalínrezistentního M30 neo-epitopu na kaspázou naštepených fragmentech
cytoskeletálního proteinu cytokeratinu 18 (CK18) lidského, opičího a
bovinního původu. M30 CytoDEATH™ nerozeznává nenaštěpený CK18.
Specifický pro apoptózu
1.3 Doporučené užití
•
•
•
•
Western blot (WB)
Imunocytochemie (ICC)
Průtoková cytometrie (FACS)
Imunohistochemie (IHC) včetně formalínem fixovaných parafínových řezů
(PS) a hlukoce zmrazených řezů (cryostat) (FS).
Bez falešně pozitivních
výsledků ve stavech provázejících poškození DNA
Exprese CK-18 je omezená pouze
- na
buňky epiteliálního původu. Protilátka M30 CytoDEATH™nedetekuje
apoptózu nervových a lymfoidních
buněk.
Široká druhová reaktivita
Neo-epitop na cytokeratinu 18 rozeznávaný protilátkou M30 CytoDEATH™ je
shodný u člověka, opice a skotu.
Universálnost použití
Protilátka M30 CytoDEATH™ byla
úspěšně použitá pro western blot,
imunocytochemii, průtokovou cytometrii a imunohistochemii, včetně
detekce na formalínem fixovaných
parafínových řezech.
Doporučené pro rutinně zpracované
histologické řezy. Umožňuje provádění
retrospektivních studií.
.1.5 Skladování a stabilita
M30 CytoDEATH™ je dodávána připravená k použití a je stabilní při
2 - 8 °C až do data expirace uvedeného na štítku.
Jinak může být skladována rozplněná po menších množstvích při -20°C.
Protilátka je odesílána zákazníkům při pokojové teplotě.
Poznámka: Vyvarujte se opakovanému zmrazování a rozmrazování.
Doporučené pro formalínem
fixované parafínové řezy
1.6 Kontrola kvality
Funkčnost protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin je testována imunohistochemickým testem na formalínem fixovaných parafínových řezech
nádorové tkáně.
časná a specifická detekce
apoptózy
Snadnost použití
Snadné provedení testu standardním
postupem. Protilátka je dodávána
zákazníkům připravená k použití.
M30 CytoDEATH™ Biotin – další výhody
M30 CytoDEATH™ – hlavní přednosti
Výhody
Zatímco technika TUNEL může vést při
výskytu zlomů v dvojšroubovici DNA
k falešně pozitivním výsledkům,
detekce pomocí protilátky
M30-CytoDeath vykazuje vyšší specifitu
v detekci apoptotických buněk než
technika TUNEL.
Specifické pro epiteliání
(tj. karcinom) apoptózu
1.4 Pracovní koncentrace
M30 CytoDEATH™ Biotin je dodávána v praktickém balení jako zásobní
roztok připravený k použití. Používejte ředění 1:1000 v inkubačním
pufru (konečná koncentrace 2,5 μg/ml)
Vlastnost
Na rozdíl od měření např. aktivity
kaspázy-3, kde je signál vymezený
určitým časovým oknem a v pozdějších fázích apoptózy, je neo-epitop
CK18 vzniklý po naštěpení kaspázou
přítomen dokonce i po rozpadu
apoptotických buněk.
Vlastnost
Rozeznává kaspázou naštěpený cytokeratin18; aktivace kaspáz je jednou z nejranějších a také nejběžnějších
známek apoptózy
Výhody
Usnadnění
immunohistochemického testu
Vlastnost
Dvojstupňový protokol pro imunohistochemickou detekci apoptózy epiteliálních
buněk. Pro detekci není nutná žádná
další sekundární protilátka označená
biotinem.
2. Základní informace
Příprava pracovní koncentrace protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin
2.1 CK18 jako substrát pro štěpení kaspázou a apoptóza
epiteliálních buněk
Nařeďte zásobní roztok protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin1:100
v Inkubačním pufru (konečná koncentrace 2,5 μg/ml).
Apoptóza spuštěná přes receptory buněčné smrti nebo jinými podněty
vede k aktivaci specifických kaspáz (1,2). Následně buňky zanikají spuštěním
vnitřní cesty programované buněčné smrti, která vede k fragmentaci DNA,
kondenzaci jádra, reorganizaci cytoskeletu, bobtnání plazmatické membrány a ztrátě mezibuněčné adheze.
Cytokeratin 18 patří mezi typ I inetrmediárních filament a je hlavní součást
buněk jednovrstevných epitelů a epiteliálních žlaz. Je exprimován ve většině
karcinomů, včetně karcinomu plic, jater, prostaty, prsní žlázy a střeva, ale není
přítomen v neuronálních a lymfoidních buňkách a tkáních. Během apoptózy,
po aktivaci efektorových kaspáz 3, 6, 7 a 9, je CK18 štěpený na proteolytické
fragmenty, přičemž se odkrývají neo-epitopy (NE) v místech štěpení (3-6).
Poznámka: Roztok protilátky by neměl obsahovat precipitát. Případně
zcentrifugujte před použitím roztok protilátky při vysokých otáčkách.
3.1.2 Postup při imunofluorescenci a průtokové cytometrii
Krok
1
2.2 Specifická detekce apoptózy pomocí
protilátky M30 CytoDEATH™
Štěpení CK18 kaspázou odkrývá neo-epitop (M30), který je specificky rozeznáván protilátkou M30 CytoDEATH™. Specifické proteolytické štěpení
CK18 je proces, který nastává před ztrátou asymetrie plazmatické membrány
a před fragmentací DNA. Početné studie potvrdily, že protilátka M30
CytoDEATH™ detekuje výhradně apoptotické a nikoliv živé či nekrotické
buňky. Při imunohistochemické detekci je reaktivita protilátky M30
CytoDEATH™ spojena s pozitivním apoptotickým indexem v TUNEL testu a
vykazuje větší spolehlivost v případech, kdy dochází k dvojřetězcovým
zlomům v DNA nezávisle na apoptóze.
Schopnost protilátky M30 CytoDEATH™ odlišit nekrotické a apoptické
epiteliální buňky pomocí průtokové cytomterie a imunohistochemie
byla potvrzena studiemi u několika onemocnění. A tak protilátka
M30 CytoDEATH™ představuje jediněčný nástroj pro snadnou a spolehlivou
detekci apoptózy v buňkách a na tkáňových řezech, a to od velmi časných
až do pokročilých stádií apoptózy.
Kromě toho jsou k dispozici dva ELISA testy postavené na detekci pomocí
protilátky M30 CytoDEATH™:
• M30 CytoDeath™ ELISA (PEVIVA Kat. číslo: 10900) je test navržený pro
multiparalelní funkční screening a in vitro charakterizaci účinku
pro-apoptotických agens při použití supernatantů z buněčných kultur,
mnohobuněčných sféroidů a tkáňových lyzátů.
• M30-Apoptosense™ ELISA (PEVIVA Kat. číslo: 10010) je CE certifikovaný
ELISA test, který byl úspěšně použit pro detekci zvýšené hladiny CK18
neo-epitopů ve vzorcích pacientské krve jako biomarker při
monitorování odpovědi na léčbu a pro stanovení rozsahu (staging)
onemocnění (9-12).
3. Postup testu a potřebný materiál
3.1 Postup při imunofluorescenci a při průtokové cytometriii
3.1.1 Úvod
Použití protilátky M30 CytoDEATH™ při imunofluorescenci a průtokové
cytometrii vyžaduje další detekční reagencie značené fluorochromy.
Poznámka: Fluoresceinem označená protilátka M30 CytoDEATH™ je
dostupná od PEVIVA (Kat. číslo 10800). Fluoresceinem označená protilátka
M30 CytoDEATH™ je doporučená pro imunofluorescenci a průtokovou
cytometrii pro snadno proveditelnou jednokrokovou detekci apoptózy.
Následující protokol popisuje detekci apoptózy pomocí protilátky
M30 CytoDEATH™ při imunofluorescenci a průtokové cytometrii.
Při použití jiné detekční metody nebo jiného druhu vzorku se mohou
optimální podmínky testu měnit a je nutné si je přizpůsobit.
Další potřebné reagencie
• PBS, Metanol a BSA
• Sekundární detekční reagens jako je streptavidin-fluorescein
(např. od DAKO)
Příprava pracovní koncentrace roztoků
Inkubační pufr: PBS s 1% BSA
Promývací pufr: PBS
Činnost
Promyjte buňky v PBS.
2
Zafixujte buňky v ledově chladném metanolu při -20°C po dobu 30 min.
3
Promyjte buňky dvakrát v Promývacím pufru.
4
Odstraňte Promývací pufr.
5
Přidejte 100 µl protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin a inkubujte
30 minut při 15 -25 °C.
6
Promyjte buňky dvakrát v Promývacím pufru.
7
Inkubujte v temnu se 100 μl konjugátu fluorescein-streptavidin
po dobu 30 minut při 15 - 25 °C.
8
Promyjte buňky dvakrát v Promývacím pufru.
9
Prohlížejte buňky pod fluorescenčním mikroskopem anebo
je nařeďte v 0,5 ml PBS a až do analýzy pomocí průtokové cytometrie
je uchovávejte v temnu
3.2 Postup při imunohistochemii
3.2.1 Úvod
Tento protokol popisuje detekci apoptózy pomocí protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin
při imunohistochemii (parafínové řezy) za použití dvojstupňové metody pro maximální
citlivost testu. Při použití jiné detekční metody nebo jiného druhu vzorku se mohou
optimální podmínky testu měnit a je nutné si je přizpůsobit.
3.2.2 Doporučené reagencie
Pro přípravu vzorků:
•
•
•
•
•
•
•
•
Xylol
Etanol 96 %
Etanol 70 %
Metanol/H2O2 (3 %)
Kyselina citrónová
NaOH, 1 M
Hematoxylin (např. od Merck)
Montovací roztok (např. Kaiserova glycerínová želatina od Merck)
Pro provedení imunohistochemického testu:
•
•
•
•
Streptavidin-křenová peroxidáza (např. od DAKO)
DAB nebo AEC substrát (např. od Zymed)
PBS
BSA
Příprava pracovních roztoků
Následující tabulka uvádí seznam potřebných pracovních roztoků pro provedení
imunohistochemického testu.
Pracovní
roztok
Složení
Stabilita/
skladování
Použití
Promývací
pufr
PBS
4 týdny
při 2– 8 °C
Promývací krok
Inkubační
pufr
PBS s 1 % BSA
4 týdny
při 2– 8 °C
Příprava
pracovního
roztoku protilátky
4 týdny
při 2– 8 °C
Regenerace
antigenu
Citrátový pufr 2 g/l kyseliny citrónové,
(0.01M)
pH=6, pH upravte
pomocí 1M NaOH
Příprava pracovního roztoku protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin
4. Výsledky
Nařeďte zásobníh roztok protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin
1:100 v Inkubačním pufru (konečná koncentrace 2,5 μg/ml).
Immunohistochemie
Poznámka: Roztok protilátky by neměl obsahovat precipitát. Případně
zcentrifugujte roztok protilátky před použitím při vysokých otáčkách.
Příprava vzroku
Před vlastním imunohistochemickým testem deparafinujte tkáňové
řezy podle postupu popsaného v následující tabulce.
Krok
Činnost
1
Vložte připravené parafínové řezy do inkubátoru nastaveném na 37°C
a nechte je přes noc zaschnout.
2
Deparafinujte formalínem fixované parafínové tkáňové řezy
následujícím postupem:
•
•
•
•
3
2 Coplinovy nádobky s xylolem (2 – 5 min),
2 Coplinovy nádobky s etanolem (96%)
1 Coplinova nádobka s etanolem (70%)
1 Coplinova nádobka s metanolem/H2O2 (3%) 10 min při 15-25 °C.
Opláchněte v PBS ~10 min
Poznámka: Řezy by během výše evedeného postupu neměly vyschnout.
3.2.3 Postup při imunohistochemickém testu
Poznámka: Pro dosažení optimálního výsledku doporučujeme postupovat
při regeneraci antigenu podle níže uvedeného protokolu.
Krok
Činnost
1
• Přiveďte do varu citrátový pufr (0,01M, pH=6,0) zahřátím
v mikrovlnné troubě zapnuté na výkon 750W.
• Jakmile se pufr začne vařit, změnte nastavení trouby na
„udržovat teplé“ (okolo 100W)
• Umístěte sklíčka s řezy do košíčku (držáku na sklíčka) a vložte
je do horkého citrátového pufru (přibližně 90˚C)
• Nechte inkubovat za tohoto nastavení po dobu 20 min.
Poznámka: Abyste se vyhnuli tvorbě bublinek pod tkánovými řezy,
doporučujeme pro dosažení optimálních výsledků udržovat
teplotu těsně pod bodem varu.
2
Opláchněte 3× v PBS a ponechte vychladnout po dobu 10 min
ve zvláštní nádobce s PBS.
3
Odstraňte inkubační pufr, naneste 100 μl pracovního roztoku
protilátky M30 CytoDEATH™ Biotin a nechte inkubovat 30 min při
15-25 ˚C ve vlhké komůrce.
4
Promyjte sklíčka Promývacím roztokem (použijte 3 zvláštní
nádoby a ponořte 3x do každé z nich).
5
Překryjte řez 100 μl roztoku streptavidin-peroxidáza
od vámi vybraného dodatavetele a v ředění podle vámi
ustanoveného optimalizovaného postupu nebo použijte reagens
od firmy DAKO v ředění 1:600.
Nechte inkubovat 30 minut při 15-25˚C ve vlhké komůrce.
6
Promyjte sklíčka Promývacím roztokem (použijte 3 zvláštní
nádoby a ponořte 3x do každé z nich).
7
Nechte sklíčka inkubovat při 15-25˚C v čerstvě připravném
roztoku substrátu (např. AEC) až do objevení se jasně
viditelného zbarvení (1-5 min). Negativní kontrola by se neměla
během inkubační doby zabarvit .
8
Zastavte reakci důkladným opláchnutím ve dvakkrát destilované
vodě.
9
Následně tkáňový řez dobarvěte hematoxylinem a uzavřete jej
(namontujte) za použití např. Kaiserovy glycerínové želatiny,
v případě, že používáte substrát AEC.
Obrázek: Detekce apoptózy na formalínem fixovaném parafínovém řezu z
lidského kolorektálního karcinomu ukazující zabarvení cytoplazmy
při detekci CK18-Asp396NE (kapsázou naštepený CK18) pomocí protilátky
M30 CytoDEATH™ Biotin. Pro detekci byl použit streptavidn-peroxidázový
konjugát a AEC jako substrát, dobarveno hematoxylinem.
5. Dodatek
Výčet CK18 pozitivních buněčných linií a tkání, pro jejichž analýzu byla
s úspěchem použita protilátka M30 CytoDEATH™ .
Lidské epiteliální buněčné linie:
Karcinom prsu: MDA-MB-231, MCF-7, HBL100
Kolorektální karcinom: WiDr, HCT 116, HT29, SW620
Karcinom děložního čípku: HeLa
Karcinom ledviny: ACHN, A498
Nádory hlavy a krku: SCC9, SCC25, FaDu
Karcinom prostaty: PC-3, LNCaP, DU 145
Karcinom močového měchýře: RT4, J82
Lidské epiteliální tkáně:
Prsní žláza, plíce, játra, pankreas, střevo, ledviny, slinné žlázy, trofoblast,
endometrium, močový měchýř, epitel dutiny ústní.
6. Další produkty firmy PEVIVA
M30 CytoDEATH™ Biotin
M30 CytoDEATH™ Fluorescein
M30 CytoDEATH™ Orange
M30 CytoDEATH™ Red
M30-Apoptosense® ELISA
M65® ELISA
M30 CytoDeath™ ELISA
Kat. číslo
Kat. číslo
Kat. číslo
Kat. číslo
Kat. číslo
Kat. číslo
Kat. číslo
10750
10800
10830
10850
10010
10020
10900
-
7. Odkazy na literaturu
Imunocytochemie
1. Creagh EM, Conroy H, Martin SJ. (2003) Caspase-activation pathways in
apoptosis and immunity. Immunol Rev. 193:10-21
MacFarlane M, Merrison W, Dinsdale D, Cohen GM. (2000) Active caspases
and cleaved cytokeratins are sequestered into cytoplasmic inclusions in
TRAIL-induced apoptosis. J Cell Biol. 148: 1239-1254.
2. Creagh EM, Martin SJ. (2001) Caspases: cellular demolition experts. Biochem Soc Trans. 29: 696-702.
3. Caulin C, Salvesen GS, Oshima G. (1997) Caspase Cleavage of keratin 18
sis. J Cell Biol. 138: 1379-1394.
4. Leers MP, Kölgen W, Björklund V, Bergman T, Tribbick G, Persson B, Björklund P, Ramaekers FCS, Björklund B, Nap M, Jörnvall H, Schutte B. (1999)
Immunocytochemical detection and mapping of a Cytokeratin 18 neoepitope exposed during early apoptosis. J Pathol. 187: 567-572.
Bjorklund V, Bjorklund P, Bjorklund B, Lane EB, Omary MB, Jornvall H, Ramaekers FCS. (2004) Keratin 8/18 breakdown and reorganization during apoptosis. Exp Cell Res. 297:11-26.
6. Dinsdale D, Lee JC, Dewson G, Cohen GM, Peter ME. (2004) Intermediate
Am J Pathol. 164: 395-407.
7. Walker JA and Quirke P. (2001) Viewing apoptosis through a “TUNEL”.
J Pathol. 95: 275-276.
8. Grassi A, Susca M, Ferri S, Gabusi E, D’Errico A, Farina G, Maccariello S, Zauli
D, Bianchi FB, Ballardini G. (2004) Detection of the M30 neoepitope as a new
tool to quantify liver apoptosis: timing and patterns of positivity on frozen and
9. Bivén K, Erdal H, Hägg M, Ueno T, Zhou R, Lynch M, Rowley B, Wood J, Zhang C,
Toi M, Shoshan MC, Linder S. (2003). A novel assay for discovery and
characterization of pro-apoptotic drugs and for monitoring apoptosis in
patient sera. Apoptosis 8: 263-268.
10. Ueno T, Toi M, Bivén K, Bando H, Ogawa T, Linder S. (2003) Measurement
of an apoptosis product in the sera of breast cancer patients. Eur J Cancer
39: 769-774.
11. Kramer G, Erdal H, Mertens H, Nap M, Mauermann J, Steiner G, Mar-
Barrett KL, Willingham JM, Garvin AJ, Willingham MC. (2001) Advances in
cyto-chemical methods for detection of apoptosis. J Histochem Cytochem
49: 821-32.
Lee JC, Schickling O, Stegh AH, Oshima RG, Dinsdale D, Cohen GM, Peter
apoptosis. J Cell Biology 158: 1051-1066.
Dinsdale D, Lee JC, Dewson G, Cohen GM, Peter ME. (2004) Intermediate
Am J Pathol. 164: 395-407.
lund V, Bjorklund P, Bjorklund B, Lane EB, Omary MB, Jornvall H, Ramaekers
FC. (2004) Keratin 8/18 breakdown and reorganization during apoptosis.
Exp Cell Res. 297:11-26.
Průtoková cytometrie
Rupa JD, De Bruine AP, Gerbers AJ, Leers MP, Nap M, Kessels AG, Schutte B, Arends
JW. (2003) Simultaneous detection of apoptosis and proliferation in colorectal
low-turnover tumors with distinct clinical outcome. Cancer 97: 2404-2411.
Morsi HM, Leers MP, Radespiel-Troger M, Björklund V, Kabarity HE, Nap M,
Jäger W. (2000) Apoptosis, bcl-2 expression, and proliferation in benign
and malignant endometrial epithelium: An approach using multiparameter
Imunohistochemie
Morsi HM, Leers MP, Jäger W, Björklund V, Radespiel-Troger M, el Kabarity H,
Nap M and Lang N. (2000) The patterns of expression of an apoptosis-related CK18 neoepitope, the bcl-2 proto-oncogene, and the Ki67 proliferation
marker in normal, hyperplastic, and malignant endometrium. Int J. Gynecol.
Pathol. 19: 118-126.
-
caspase activation and early apoptosis in liver diseases. Eur J Cell Biol. 80:
230-239
12. Linder S, Havelka AM, Ueno T, Shoshan MC. (2004) Determining tumor
apoptosis and necrosis in patient serum using cytokeratin 18 as a biomarker.
Cancer Lett. 214: 1-9.
Fukuda M, Tanaka A, Kitada M, Fukuda F, Suzuki S, Jiang Y, Kebusa Y, Ohno
J, Yamamoto Y, Minato H, Nonomura A, Sakashita H, Kusama K. (2001) Immunohistochemical detection of cytokeratin 18 and its neo-epitope in
Warthin’s tumor (adenolymphoma) of the parotid glands. Anticancer Res
21:109-12.
cellular cytokeratin 18. Cancer Res. 64: 751-1756.
8. Odkazy na použití M30 CytoDEATH™
Western blot
Leers MP, Kölgen W, Björklund V, Bergman T, Tribbick G, Persson B, Björklund
P, Ramaekers FCS, Björklund B, Nap M, Jörnvall H, Schutte B. (1999) Immunocytochemical detection and mapping of a Cytokeratin 18 neo-epitope
exposed during early apoptosis. J Pathol. 187: 567-572.
Ueno T, Toi M, Bivén K, Bando H, Ogawa T, Linder S. (2003) Measurement of
an apoptosis product in the sera of breast cancer patients. Eur J Cancer 39:
769-774.
Sheard MA, Vojtesek B, Simickova M, Valik D. (2002) Release of Cytokeratin-18
and –19 Fragments (TPS and Cyfra 21-1) into the extracellular space during
apoptosis. J Cell Biochem 85: 670-677.
Thurnher D, Turhani D, Pelzmann M, Wannemacher B, Knerer B, Formanek M,
Wacheck V, Selzer E. (2003) A new cytotoxic compound against malignant
head & neck cancer cells. Head & Neck 25: 732-740.
Bjorklund V, Bjorklund P, Bjorklund B, Lane EB, Omary MB, Jornvall H, Ramaekers FC (2004) Keratin 8/18 breakdown and reorganization during apoptosis. Exp Cell Res. 297:11-26.
Walker JA and Quirke P. (2001) Viewing apoptosis through a “TUNEL”. J.
Pathol 195: 275-276
Leers MP, Björklund V, Björklund B, Jörnvall H, Nap M. (2002)
An immunohistochemical study of the clearance of apoptotic cellular fragments. Cell Mol Life Sci. 59: 1358-1365.
Grassi A, Susca M, Ferri S, Gabusi E, D’Errico A, Farina G, Maccariello S, Zauli
D, Bianchi FB, Ballardini G. (2004) Detection of the M30 neoepitope as a new
tool to quantify liver apoptosis: timing and patterns of positivity on frozen
Koornstra JJ, Rijcken FE, De Jong S, Hollema H, De Vries E, Kleibeuker JH.
(2004) Assessment of apoptosis by M30 immunoreactivity and the correlation with morphological criteria in normal colorectal mucosa, adenomas
and carcinomas. Histopathol. 44: 9-17.
Takada M, Kataoka A, Toi M, Bando H, Toyama K, Horiguchi S, Ueno T, Linder
S, Saji S, Hayashi Y, Funata N, Kinoshita J, Murakami S, Ohono S. (2004) A
close association between alteration in growth kinetics by neoadjuvant
chemotherapy and survival outcome in primary breast cancer. Int J Oncol.
25: 397-405.
Simopoulos C, Tsaroucha AK, Asimakopoulos B, Giatromanolaki A, Gavriilidis P, Polychronidis A, Karayiannakis A. (2008) Total and caspase-cleaved
cytokeratin 18 in chronic cholecystitis: a prospective study. BMC Gasteroenterol. 8:14–18.
Pro další, aktuální informace navštivte prosím stránku www.peviva.se .
PEVIVA AB, Strömkarlsvägen 82, SE-167 62 Bromma/Sweden
Website: www.peviva.se E-mail: [email protected]
Telephone: +46 (0)8 122 053 00 Telefax: +46 (0)8 730 16 10
Copyright © 2009 PEVIVA AB. Všechna práva vyhrazena.
Číslo originálního doumentu 90693
Překlad:17-12-2010-VIDIA