Chemie a živý organismus

„UNIVERSITA 3. VĚKU – U3V: 2008 - 2009“
CHEMIE & ŽIVÝ ORGANISMUS
BIOLOGICKY AKTIVNÍ LÁTKA
A
JEJÍ INTERAKCE S ŽIVÝM ORGANISMEM
Doc. Ing. Petr Kačer Ph.D.
Ústav Organické Technologie
Fakulta Chemické Technologie
BIOLOGICKÝ
SYSTÉM
BIOLOGICKY
AKTIVNÍ LÁTKA
č. dv. 77 případně 79 (budova A)
E-mail: [email protected]
Tel:
220 444 156
XENOBIOTIKUM,
LÉČIVA,
VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO TECHNOLOGICKÁ PRAHA
VONNÉ LÁTKY …
FARMAKOLOGIE
FARMAKOLOGIE
FARMAKOLOGIE na Ústavu organické technologie?
Definice:
•
Vývoj technologií z oblasti chemických specialit – farmak.
•
Vývoj stereoselektivních katalytických procesů (katalyzátorů)
•
Vývoj nových nosičů pro BNCT (Boron Neutron Capture Therapy)
•
Farmakokinetické studie
•
Vývoj diagnostických metod – včasná diagnostika patologických procesů
•
Vývoj separačních procesů – analytických metod s cílem strukturní
identifikace kontaminantů – hmotnostnÍ spektrometrie v kombinaci s vhodnou
separační metodou (plynová chromatografie, kapalinová chromatografie)
Farmakologie je věda studující interakce (vzájemné působení) léčiv a
biologických systémů.
•
Vývoj technologií z oblasti chemických specialit – farmak.
WO patent na výrobní postup CYTOSTATIKA „OXALIPLATINy“
společně s ICN Ltd.
CYTOSTATIKA: látky zpomalující příp. zastavující růst
buněk či způsobující jejich de
O
NH2
O
Pt
NH2
O
O
Ideální protinádorová látka zničí nádorovou buňku aniž by
poškodila buňky normální – IDEÁLNÍ STAV
•
Schéma patentovaného výrobního postupu:
NH2
+
OXALIPLATINA – skupina alkylačních cytostatik
Pojem „CIVILIZAČNÍ ONEMOCNĚNÍ“ versus „Pokroky vědy“
NH2
K2PtCl4
Cl
NH2
+
AgNO3
Cl
NH2
OH2
NH2
OH2
NH2
NH2
NH2
OH2
NH2
Pt
V roce 2004 : zemřelo na nádorová onemocnění 2,2 x více lidí než ve 2.světové válce
Marketing ICN: Za 5 let se 2 x zvýší výskyt kolonorektálních karcinomú a spotřeba
oxaliplatiny
Bez
„vícejaderných“ komplexů
OH2
Pt
NH2
NH2
Cl
NH2
Pt
Poč. 20 století přežilo méně než 10 % lidí diagnostikované nádorové onemocnění
Dnes přežívá – „vyléčí se“ – více než 50 %
Cl
Pt
NH2
NH2
OXALIPLATINA
Vývoj technologií z oblasti chemických specialit – farmak.
OH
NOVÝ KROK
Pt
OH
HO
OH
+
O
Pt
OH
NH2
O
O
O
O
Pt
O
OH
NH2
OXALIPLATINA
Výtěžek > 90 %
Čistota – bez Ag+
1
•
Vývoj technologií z oblasti chemických specialit – farmak.
• Vývoj stereoselektivních katalytických procesů (katalyzátorů)
WO patent na výrobní postup CYTOSTATIKA „OXALIPLATINy“
společně s ICN Ltd.
Problém č.1:
Přítomnost Ag+
NH2
O
O
NH2
O
O
CHIRALITA • Stejná konstituce, stejné relativní rozložení jednotlivých atomů
• Stejné fyzikální a chemické vlastnosti v achirálním prostředí
s výjimkou stáčení roviny polarizovaného světla (+) a (-).
• Vzájemný vztah jako vzor a obraz
• Možnost zcela odlišné interakce s biologickým systémem
receptorem, enzymem (vždy chirální)
A/ nerozpustná sůl Ag – separace
Pt
IONTOMĚNIČ
OXALIPLATINA
Problém č.2:
B/ tvorba polyjaderných komlexů
Problém č.3:
Množství polyjaderných komplexú
O
O
N
N
H
Smáčivost „dichlorokomplexu
O
O
Přídavek MTBE a intenzivní míchání
H
N
H
O
N
H
O
(R)-thalidoimid
Potlačení makrokinetických parametrů
0
7
Výtěžek 40 %
60 % odpad po 5 stupňové syntéze
Cíl:
CHIRAL SWITCH
MALIGNÍ GLIOBLASTOM
OMe
MeO
MeO
HOOC
H O
(S)-N-ftalylaparagová kyselina
(S)-thalidoimid
(Neutron Capture Therapy)
OMe
O
N
•Vývoj nových nosičů pro BNCT (Boron Neutron Capture Therapy)
Stereoselektivní hydrogenace prekursorů HIV virostatik
stereoselektivní separace racemické směsi
HOOC
O
O
CONTERGAN
14
• Vývoj stereoselektivních katalytických procesů (katalyzátorů)
Současný stav:
TERATOGEN
1 milion obyvatel - 60 případů
MeO
N
MeO
MeO
MeO
MeO
MeO
N
Princip :
Kombinovaná léčba:
n0
n0
60 dní přežívá 1% pacientů
BNCT
„Heterogenizace“
Komplex
Komplex
Spacer
5 let přežívá 50 % pacientů
n0 pomalý neutron s nízkou energií (neionizuje tkáne)
n0 neutron vysokou energií - destrukce nejbližší bunky
10 let přežívá 30 % pacientů
Nosič
•Vývoj nových nosičů pro BNCT (Boron Neutron Capture Therapy)
(Boron Neutron Capture Therapy)
„BPA“
3. Generace látek pro BNCT
Látky selektivně vychytávány n. buňkou
Ve fázi klinického testování
COOH
Využití antigenů, jako nosičů bóru,
HO
BPA
batch: 00107004
date: Jan 25, 2005
Pulse Sequence: s2pul
1H
Antiandrogeny – látky působící proti účinku mužských pohlavních hormonů
Výráběno podle GMP
Analytická kontrola čistoty ÚOT
B
Koncentrace Fluoridilu v krevní plazmě
Skupina 100 pacientů po aplikaci Fluoridilu
NH2
10
• Farmakokinetické studie
OH
NMR
10B
BPA
b a tc h : 0010 7004
d a te: Fe b 1 , 2005
1 0B NM R
Pulse Se q ue nc e: s2p ul
NMR
protože jsou dnes k dispozici
Skupina 100 pacientů po podaném placebu
koncentrace
KINETIKA
Složení krve
monoklonární protilátky proti antigenům
Plazma
různých linií nádorových buněk.
Bílé krvinky
Červené krvinky
7.5
7.0
6.5
6.0
5.5
5.0
4.5
4.0
3.5
3.0
ppm
70
60
50
40
30
20
10
0
-10
ppm
čas
2
Medicinální diagnostika a hmotnostní spektrometrie
Hmotnostní spektrometrie
Medicinální diagnostika:
Hmotnostní spektrometrie:
- „Klasické“ biochemické metody
- Metody zobrazovací
- HPLC, GC/MS
- Kvalitativní a kvantitativní metoda
- Citlivost – detekční limit (fmol/μl)
- Hmotnostní rozsah (400 000 Da)
Medicína
HPLC/MS
Kvalitativní info
Kvantitativní info
VSTUP DO
PŘÍSTROJE
IONIZACE
SEPARÁTOR
IONTŮ
DETEKTOR
IDENTIFIKACE
LÁTEK
METODA PRO MEDICINÁLNÍ DIAGNOSTIKU
Hmotnostní spektrometrie počet přístrojů v různých odvětvích:
2005
Biochemie
Biochemie
2010
Chemie
VAKUOVÝ
SYSTÉM
Chemie
Fyzika
Medicína
HMOTOVÉ
SPEKTRUM
Fyzika
Separační techniky pro MS
• Vývoj diagnostických metod – včasná diagnostika patologickýh procesů
Přítomnosti Staphyloccodových enterotoxinů v komplexních matricích
GC/MS
Plyny, těkavé látky
Princip: Magnetická separace z koplexních směsí
HPLC/MS
Neodpařitelné látky
Imunoseparace (např. detekce SEB v k. matrici)
Magnetické částice:
regulace tlaku
nástřik vzorku
Fe3O4 pokryté vrstvou polymeru
dávkovač vzorku
pomocí ventilů
zásobník mobilní
fáze
regulace průtoku
Funkcionalizace pro navázání protilátky
kolona
pro HPLC
kolona pro
plynovou
chromatografii
manometr
vstup do MS
tlumič
tlakových
nárazů
čerpadlo
termostat
filtr
vstup do MS
• Vývoj diagnostických metod – včasná diagnostika patologických procesů
Detekce:
Hmotnostní spektrometrie
Netermické převedení molekuly (makromolekuly) do g-fáze
Ionizace (MALDI, ESI, APCI)
Immunoseparace:
Určení molekulové hmotnosti
Citlivost (1fmol/ml)
Selektivita
• Vývoj metodiky pro neinvasivní diagnostiku Asthma Bronchialae
Opakované epizodické stavy dušnosti způsobené bronchokonstrikcí na základě
zánětu dýchacích cest
Civilizační onemocnění – rostoucí počet případů – snižující se věk první incidence (2-3
roky života)
Obtížná diagnostika – opakované vyvolávání „umělého astmatického záchvatu“ – pro
atmatického pacienta stresující
MALDI
Magnetická separace:
Analýza dechového kondenzátu
DECHOVÉ
OBTÍŽE
INVAZIVNÍ
VYŠETŘENÍ
SPRÁVNÁ
DIAGNÓZA
DIAGNOSTIKA
TERAPIE
HPLC/MS
3
HPLC/MS Leukotrienů a 8-isoprostanu
„Dechový kondenzát“
• Kondenzát aerosolových částic obsažených ve vydechovaném vzduchu
• Složení „Dechového kondenzátu“ odráží složení bronchoalveolární extracelulární
plicní tekutiny, které koresponduje s ději odehrávajícími se v plicích
Leukotrieny:
• Složení „Dechového kondenzátu“:
OH
- Plynná fáze - těkavé látky (CO, NO)
- Kapalná fáze – vodní fáze, H2O2 a netěkavé
látky (eikosanoidy – MARKERY zánětlivé reakce)
OH
LEUKOTRIENY:
Fyziologická hladina:
1-10 pg/μl
Patologická úroveň:
25-100 pg/μl
B4
COOH
LTD4
8-ISOPROSTAN:
NH2
HOOC
LTC4
O
NH
ZAŘÍZENÍ K ZÍSKÁNÍ „DECHOVÉHO KONDENZÁTU“:
LTE4
O
H
N
S
OH
O
C4
COOH
OH
NH2
S
Fyziologická hladina:
10 -50 pg/μl
Patologická úroveň:
> 100 pg/μl
O
H
N
8-isoprostan
OH
D4
O
COOH
MEZ DETEKCE: 0,05 pg/μl
OH
NH2
COOH
S
E4
COOH
MEZ KVANTIKIKACE: 0,1 pg/μl
OH
„Inborn Errors“
Vývoj separačních procesů – analytických metod s cílem strukturní
Diagnostika metabolických a farmakogenetických poruch
identifikace kontaminantů
Farmakogenetická porucha se nedemonstruje do té doby dokud není
podána látka na, kterou daný jedinec reaguje odlišně
Iohexol
OH
O
I
I
Metabolická porucha se projeví vždy (je-li) dostatečně intensivní
OH
HO
Idiosynkrasie - nepřiměřené nežádoucí účinky
H3C
HPLC/MS stanovené plazmatické hladiny látky nebo enzymu, která
demonstruje příslušnou abnormalitu
I
O
Některé nečistoty toxické
OH
N
N
Identifikace nečistot s obsahem > 0.2 %
OH
N
OH
O
Kombinace metod:
Vliv na prodejnost daného produktu
preparativní HPLC
HPLC/MS
Incidence cca 1 : 10 000 nebo větší
NMR
V jediné HPLC/MS analýze možné stanovit až 200 „markerů“ inborn errors
Syntéza potenciálních nečistot
Identifikované nečistoty – metoda v Eur. Pharmacopeia
FARMAKOLOGIE
IOHEXOL impuritiea according to EP2005
OH
H
N
O
OH
I
I
I
O
C16H20I3N 3O7
747.06
OH
H
N
HN
O
O
H
N
O
OH
OH
I
I
H2 N
I
I
C 14H 18I3N 3O6
705.02
OH
H
N
OH
O
A. "NA-ATIBA-A"
O
OH
H
N
HO
OH
O
C21H28I3N3O10
863.18
I
I
OH
H
N
N
OH
HO
HO
C21H28I3N3O10
863.18
I
OH
H
N
OH
O
I
O
O. "3-O-acetyl"
N. "2-O-acetyl"
OH
O
N
O
I
O
HO
J. "ATIBA-A"
O
OH
H
N
O
HO
OH
H
N
O
OH
O
I
O
I
I
O
HO
H
N
I
O
C14H19I2N3O6
579.13
O
I
OH
OH
HO
O
OH
H
N
N
HO
I
O
C22H32I3N3O11
895.22
HN
OH
I
O
O
O
OH
C 22H 32I3N3O11
895.22
HO
N
HO
I
O
OH
C19 H27 I2N3O9
695.24
OH
O
HO
OH
O
Farmakologie je věda studující interakce (vzájemné působení) léčiv a
OH
H
N
I
N
H
OH
C17 H25 I2N3O8
653.20
biologických systémů.
OH
O
I
HO
M. "diiodo N-alkyl amine"
H. "diiodo Iohexol"
C. "5-N-O-alkyl"
C16H21I2N3O7
621.16
OH
H
N
O
OH
H
N
I
OH
G. "NA-ADIBA-A"
OH
H
N
O
OH
I
OH
H
N
I
OH
F. "ADIBA-A"
OH
H
N
O
I
OH
O
H
N
Definice:
OH
H
N
O
OH
I
H2 N
OH
OH
OH
H
N
O
OH
Q. "diacetyl - 2 -O-alkyl"
I
N
O
I
C 21H 28I3N3O10
863.18
OH
H
N
OH
H
N
O
OH
I
O
"diacetyl - 3 -O-alkyl"
I
O
I
N
O
P.
HO
O
C21H28I3N3O10
863.18
OH
H
N
O
OH
OH
H
N
N
B. "5-N- O-alkyl"
Poznámka: Farmakologii je nutné odlišit od farmacie, která se zabývá farmaky
OH
HO
I
HO
HO
OH
H
N
O
H
N
N
O
I
OH
O
I
OH
OH
O
I
HO
HO
D. "3-O-alkyl"
O
H
N
O
OH
C22H32I3N 3O11
895.22
H
N
N
O
I
O
E. "2-O-alkyl"
R
O
OH
C 22H 32I3N3O11
895.22
I
OH
OH
I
5-ATPA
5-ATIPA dichloride
R
H2N
I
HO
O
OH
I
H
N
N
H
O
K. R= ---OH
L. R= ---Cl
OH
H
N
O
I
I
I.
OH
C17 H23 I2N3O8
651.19
především po stránce chemické a technologické.
OH
O
"benzoxazine"
page 1
page 2
4
1. ETAPA – „etapa přírodních léčiv“
Historické milníky na cestě k moderní farmakologii
Léčiva z přírodních zdrojů („lidové léčitelství“)
….
….
Průmyslově vyráběná chemoterapeutika definovaného složení a účinku
Cílený farmaceutický výzkum
Empirický přístup „metoda pokus – omyl“
Výsledkem této etapy – obrovské množství poznatků o účincích přírodních látek
na lidský organismus (nejen účinky léčivé).
Psychotropní účinky opia.
Psychostimolační účinky koky aj.
1. ETAPA – etapa přírodních léčiv
empirický přístup „metoda pokus – omyl“
Výsledkem této etapy – obrovské množství poznatků o účincích přírodních
látek na lidský organismus (nejen účinky léčivé).
Psychotropní účinky opia.
Psychostimolační účinky koky aj.
• Císař Šen-nung (2 700 př. n. l.)
nejstarší systematická studie o bylinné medicíně
Šen-nungův herbář – možnosti lékařského využití 365 drog
Rod Ephedra – léčba onemocnění dolních cest dýchacích
Ricinus communis, Papaver somniferum
1. ETAPA – „etapa přírodních léčiv“
• „Asyrské dědictví“ 660 hliněných destiček zaznamenávajících 1500 let bylinné
medicíny
1. ETAPA – „etapa přírodních léčiv“
Avicenna (930 – 1036) – „Kánon medicíny“
• „Ebersův papyrus“ 1500 př. n.l.
Archeolog Georg Ebers (1862)
informace o farmacii a chirurgii ve starověkém Egyptě (800 léčebných metod)
Ibn al-Baitar „Corpus simplex“ (1 400 léků a léčivých bylin)
•Hippokrates (460 – 380 př. n. l.)
„přikládá stejný význam diagnostice jako terapii“
Klášterní medicína: „De viribus herbarum“ Od biskup z Magdeburku
„Antidotarium“ Nicolaus ze Salerna
„Liber propietaribus rerum“ Bartholomeus Anglica
„Leechbook of Bald“ (900 – 950) doba Alfréda Velikého
•Theofrastus (370 - 285 př. n. l.) – Historia plantarum
William Turner „New Herball“
• Plinius, Celsus („De medicina“), (512) Kodex Juliana Anicia
• Galenos (129 – 199) – provedl řadu anatomických a fyziologických experimentů
„FARMAKOLOGIE“ - počátek
DÁVKA – léčivo nebo jed?
„Chceme-li správně vyložit každý jed,
DEFINICE:
copak tedy není jedem? Všechny věci
Jako jed tedy označujeme látku, která vpravena do organismu nebo na organismus
v relativně malém množství a působící chemicky nebo fyzikálně-chemicky, je sto
jsou jed a nic není bez jedu, pouze
vážně poškodit organismus nebo přivodit dokonce i smrt.
dávka rozhoduje, že věc není jedem“
NaCl
Základní axiom farmakologie
„ Pouze dávka rozhoduje,
je-li látka jedem “
Aureolus Philippus Theoprastus
Bombastus von Hohenheim
Paracelsus
(1493-1541)
LD95
= 2.5 g.kg-1 =>
200 g / člověk
Destilovaná voda LD95
= 150 g.kg-1 =>
= 11 l / člověk
Botulotoxin
LD95 = 300 pg.kg-1 =>
(100 g ideálně rozdávkovaných by spolehlivě
stačilo k vyhubení celého lidstva)
BOTULOTOXN
5
2. ETAPA – „ Léčení jednoduchými směsmi chem. sloučenin
případně chemickými individuii“
2. ETAPA – „ Léčení jednoduchými směsmi chem. sloučenin
případně chemickými individuii“
Karl Wilhelm Scheele (1742 - 1786)
Izolace glycerolu, k. benzoové, kyseliny jablečné, kyseliny vinné,
kyseliny močové
Sertürner 1803 isolace morfinu z opia
V průběhu 19. století vzniká specializovaný farmaceutický průmysl
• Průmyslově se isoluje antimalarikum a antipyretikum Chinin z kůry
chininovníku
• První inhalační anestetika – chloroform, diethylether
• 1874 – Kolbe a Schmidt – průmyslová syntéza kyseliny salicylové
3. ETAPA – „ léčiva vznikají cílenou obměnou struktury
přírodní nebo syntetické látky o známém biologickém ůčinku“
ASPIRIN
Vrba (Salix)
Antika (Hippokratés, Plinius Starší) - léčebné účinky částí vrby
Používání kůry, listů a mízy z vrby pro přípravu různých léků, především proti
horečce a bolestem. Použivání po staletí pouze na základě prakt. zkušeností.
19. Století isolace salicinu a k. salicylové
Felix Hoffmann - 1897 - nový postup výroby kyseliny acetylsalicylové, který
mohl být využíván v průmyslovém měřítku a který vedl k získání čistého a
stabilního produktu
1899 – fa Bayer, uvádí na trh “Aspirin” (zkratkové slovo z acetyl-spirsalic-acidin)
4. ETAPA – „ léčiva syntetizovaná na základě korelačních
vztahů mezi strukturou a biologickou aktivitou“
QSAR – „Quantitative Structure-Activity Relationship“
Tento přístup se dodnes uplatňuje ve farmaceutickém výzkumu jako
jedna z metod pro vyhledávání nových léčiv
Racionalizace tohoto přístupu s rozvojem farmakokinetiky (transportních
mechanismů) a farmakodynamiky (znalost struktury receptorů)
„Tento bod je možné považovat za vznik farmakologie jako samostatného
vědeckého oboru“
Znalost vztahů mezi strukturou chemických látek a jejich biologickou
aktivitou teoreticky umožňuje predikovat biologickou aktivitu i u látek,
které nebyly doposud syntetizovány a tak racionalizovat proces
vyhledávání nových léčiv
Potenciální 5. etapa – kombinatoriální chemie
Syntéza a základní screening biologické
aktivity 100 – 10 000 látek
4. ETAPA – „ léčiva syntetizovaná na základě korelačních
vztahů mezi strukturou a biologickou aktivitou“
Enzym
Nesteroidní antiflogistika
Enzym
+
Substrát
Nobel Prize in Physiology or Medicine
V rámci této etapy došlo k největším změnám v oblasti testování a
hodnocení nových léčiv
Thalidoimid – druhová specifita – spouštěcí mechanismus tohoto
procesu
Vliv i na farmaceutickou výrobu a kontrolu jakosti
GMP – Good Manufacturing Practise
GLP - Good Laboratory Practise
Cílem je minimalizace rizika, že se na trhu objeví lék nevyhovující kvality
v důsledku selhání lidského faktoru či jinou souhrou okolností
http://almaz.com/nobel/medicine/medicine.html
6
Emil Adolf von Behring
Nobel Prize in Physiology and Medicine in 1901
1901 Nobelova cena za práce v oblasti serologie
(objev séra proti záškrtu)
Mladý Behring začal studovat účinky jodoformu,
kterého se hojně používalo jako desinfekčního prostředku.
Během své práce zjistil, že jodoform ničí jedovaté produkty
bakterií způsobující hnisavá onemocnění, tzv. toxiny.
Poté se začal věnovat studiu toxinů a antitoxinů a
učinil důležitý objev. V séru očkovaných zvířat zjistil ochranné
protilátky vytvořené proti choroboplodným zárodkům, kterými
zvířata infikoval. Tím byl učiněn důležitý krok k vysvětlení
podstaty imunity. Behring se následně věnoval získání protilátky
k bacilu záškrtu a koncem roku 1890 se mu podařilo vypracovat
metodu výroby léčivého séra z krve koní, kterým vstříkl do krve
záškrtový toxin. Díky Behringovu séru přestal být záškrt smrtelnou
hrozbou pro tisíce dětí, které by mu každoročně podlehly.
Sir Alexander Fleming
Nobel Prize in Physiology or Medicine in 1945
V roce 1922 dosáhl prvního významného úspěchu, když objevil lysozym, látku podmiňující odolnost
organizmu proti mikrobům. V roce 1928 Fleming započal se studiem stafylokoků – mikrobů, kteří
způsobují různá hnisavá onemocnění. Kultivoval na Petriho miskách bakteriální kultury a jednou se
mu náhodou dostal do kultury ze vzduchu zárodek plísně. Fleming zjistil, že stafylokoky hynou tam,
kde se plíseň rozrostla, a to ho upoutalo natolik, že naočkoval do kultur různé mikroby a studoval
procesy, které v nich probíhaly. Koncem roku 1928 uveřejnil výsledky svých výzkumů a v jedné ze
zpráv nazval filtrát z plísňového výtažku penicilínem, podle plísně Penicillium notatum, kterou přesně
popsal. Flemingův objev penicilínu způsobil v medicíně obrovský převrat.
Macleod a Banting
Nobel Prize in Physiology or Medicine in 1923
Na počátku své vědecké dráhy Macleod zkoumal účinek stlačeného vzduchu na zvířatech,
později se věnoval uhlovodíkům a chemii dýchání. Během svého působení ve Spojených státech a
Kanadě se zabýval studiem glukózy, zkoumal primární a sekundární nervstvo, obsah cukru v krvi,
extrakt pankreatu a problémy cukrovky. Světového uznání se Macleodovi dostalo společně s Bantingem
za objev hormonu pankreatu, který byl nazván inzulín. O objev se zasloužil tím, že Bantingovi vytvořil co
nejlepší podmínky pro výzkum na torontské univerzitě, ale také svou vlastní vědeckou prací, která se týkala
hlavně konkrétního výzkumu extraktu z pankreatu, a prozkoumáním možností pro využití inzulínu při
léčení cukrovky.
Prvním pacientem, kterému Macleod společně s Bantingem injekcí inzulínu zachránili život, byl
čtrnáctiletý chlapec, který by jinak bez pomoci zemřel. Od té doby zachránil inzulín milióny nemocných
a stal se při léčení cukrovky naprosto nepostradatelným.
J. Robin Warren
Nobel Prize in Physiology or Medicine in 2005
Bakterie Helicobacter pylori (dříve Campylobacter)
je známa řadu desetiletí, její klinický význam však vzrostl teprve
v roce 1982, kdy Warren a Marshal popsali přímý vztah
k epithelu žaludeční sliznice u nemocných s gastritidou
nebo žaludečními vředy.
7